[发明专利]一种快速提取基因组DNA的方法在审
申请号: | 201810811700.7 | 申请日: | 2018-07-23 |
公开(公告)号: | CN108866044A | 公开(公告)日: | 2018-11-23 |
发明(设计)人: | 刘智;陈国忠 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学鄂州工业技术研究院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 黄君军 |
地址: | 436044 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种快速提取基因组DNA的方法,其包括制备用于结合DNA的纤维素滤纸条;分别配制好裂解液,清洗液,以及洗脱液和/或扩增液;将含目标DNA的菌液浸入到含有所述裂解液中,裂解后得到粗提液;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述裂解后的粗提液中结合核酸;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中,去除杂质;将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液/扩增液中,将核酸洗脱下来,得到目标DNA的粗提液;该方法利用纤维素纸在30s内即可纯化来源于动物,植物,微生物材料的DNA,不需要复杂的过滤,特定的装备,如移液枪,离心机;时间、材料成本低、样品适用性广。 | ||
搜索关键词: | 浸入 纤维素 纸条 粗提液 基因组DNA 快速提取 目标DNA 扩增液 裂解液 清洗液 洗脱液 裂解 微生物材料 离心机 材料成本 核酸洗脱 纤维素纸 移液枪 核酸 菌液 去除 制备 过滤 配制 | ||
【主权项】:
1.一种快速提取基因组DNA的方法,其特征在于,其包括如下步骤:步骤1、制备用于结合DNA的纤维素滤纸条:将纤维素中速定性滤纸的一部分浸泡在融化的石蜡中,浸过石蜡的滤纸为所述手柄区,另一部分没有浸过石蜡的滤纸为所述核酸结合区;步骤2、分别配制好裂解液,清洗液,以及洗脱液和/或扩增液;步骤3、将含目标DNA的样品浸入到所述裂解液中,裂解后得到粗提液;步骤4、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述步骤3中裂解后的粗提液中结合核酸;步骤5、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中,去除杂质;步骤6、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液中,将核酸洗脱下来,得到目标DNA的粗提液;或者将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条直接浸入到扩增液中,将核酸洗脱下来直接用于后续扩增;或者先将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液中,再浸入到扩增液中。
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