[发明专利]一种具有抗菌功能的级联酶反应微球及其制备方法

摘要

本发明公开了一种具有抗菌功能的级联酶反应微球及其制备方法。该方法是将葡萄糖氧化酶和血红蛋白一起溶解到氯化锰溶液中，在搅拌的条件下，迅速加入碳酸钠溶液，得到同时包埋酶和蛋白质的碳酸锰粒子，在粒子表面组装聚电解质多层膜，通过戊二醛交联稳定粒子结构，加入乙二胺四乙酸钠溶液去除碳酸锰模板，从而得到具有级联酶反应功能的微球，该微球可以利用葡萄糖通过级联酶反应生成高活性的羟基自由基，具有很好的抗菌性能。本发明制备方法简单，材料来源广泛，生产效率高，得到的具有酶级联反应功能的微球具有良好的稳定性和杀死耐药菌等特点，具有良好应用前景。

主权项

1.一种具有抗菌功能的级联酶反应微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)配制等浓度的氯化锰溶液和碳酸钠溶液，将葡萄糖氧化酶(GOx)和血红蛋白(Hb)溶于氯化锰溶液中，最终氯化锰溶液中GOx和Hb的总浓度为1～10mg/mL，GOx和Hb的质量比为1:5；在高速搅拌下，迅速加入与氯化锰溶液等体积的碳酸钠溶液，1min后停止搅拌，从而得到包埋有GOx和Hb的碳酸锰粒子，离心去除上清液，并用去离子水洗涤粒子多次；2)取步骤1)所得的碳酸锰粒子分散于去离子水中制成浓度为20mg/mL的悬浮液,离心去除上清液，加入浓度为1～2mg/mL的聚阳离子溶液，震荡10～20min，离心去除上清液，加入去离子水洗涤粒子多次；然后加入浓度为1～2mg/mL的聚阴离子溶液，震荡10～20min，离心去除上清液，用去离子水洗涤粒子多次，得到表面为聚阴离子的粒子；所述的碳酸锰粒子悬浮液、聚阳离子溶液及聚阴离子溶液为等体积；3)将步骤2)所得的粒子分散到质量浓度为0.025％的戊二醛溶液中，震荡至少1h，离心去除上清液，并用去离子水洗涤多次；4)将步骤3)所得的粒子分散到1mg/mL的甘氨酸溶液中，震荡至少1h，离心去除上清液，并用去离子水洗涤多次；5)将步骤4)所得的粒子分散到0.2mol/L乙二胺四乙酸钠溶液中，震荡20～30min，离心去除上清液，并用EDTA溶液洗涤多次，再用去离子水洗涤多次，去除碳酸锰模板得到具有抗菌功能的级联酶反应微球。