[发明专利]一种编码易错DNA聚合酶及其制备方法有效
| 申请号： | 201810831279.6 | 申请日： | 2018-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN108949719B | 公开（公告）日： | 2020-12-15 |
| 发明（设计）人： | 刘承芸;杨秀清 | 申请（专利权）人： | 山西医科大学;山西大学 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/70 |
| 代理公司： | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人： | 郭海燕 |
| 地址： | 030001 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种编码易错DNA聚合酶及其制备方法。本发明易错DNA聚合酶的制备方法，包括以下步骤：(1)提取红球菌基因组DNA，测序，比对，得到易错DNA聚合酶基因序列SEQ ID NO：1；(2)克隆SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，得到核苷酸片段；(3)将核苷酸片段和质粒pET32a进行连接，构建重组质粒；(4)将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21中，获得表达菌株；(5)利用LB液体培养基培养表达菌株，加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导16‑20h，裂解菌体，纯化，获得重组易错DNA聚合酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明提高了易错DNA聚合酶表达和纯化效率，以获得稳定、高活力的易错DNA聚合酶，提高易错效果。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 编码 dna 聚合 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种编码易错DNA聚合酶，其特征在于，所述编码易错DNA聚合酶氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，基因序列如SEQ ID NO：2所示。
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