[发明专利]一种基于三螺旋分子信标的可同时检测两种HIVDNA序列的荧光探针在审
| 申请号： | 201810834448.1 | 申请日： | 2018-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN109097440A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 蔡昌群;向灵;龚行;韩云鹏 | 申请（专利权）人： | 湘潭大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6813;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 411105 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提出了一种基于三螺旋分子信标的可同时检测两种HIV DNA序列的荧光探针。两个探针序列(2‑AP序列和G‑四链体序列)分别被cDNA1和cDNA2的茎部锁住，表现为弱荧光状态。当加入目标物HIV‑1和HIV‑2时，目标物HIV‑1和HIV‑2分别与cDNA1和cDNA2部分互补配对，破坏三螺旋的稳定结构，将分子信标打开，释放出探针序列。因此由于释放出2‑AP或者通过在释放后形成的G‑四链体中嵌入染料硫磺素T(THT)而使荧光得到回升。该荧光探针可用于对目标HIV DNA进行高灵敏度、高选择性的检测。其对HIV‑1的检出限为227pM，对HIV‑2则为352pM。此外，其可用于真实生物样品中HIV DNA的检测，并表现出极好的回收结果，这为在生物流体中特异性检测HIV DNA提供了巨大潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 荧光探针 三螺旋 检测 探针序列 目标物 四链体 可用 释放 特异性检测 分子信标 高灵敏度 高选择性 互补配对 巨大潜力 生物流体 生物样品 稳定结构 荧光状态 检出限 染料 硫磺 荧光 茎部 锁住 嵌入 表现 回收 | ||
【主权项】：
1.一种基于检测HIV基因的荧光探针，其特征在于以下合成步骤：(1)将0.5μM含有聚AT的dsDNA和1μM cDNA加入到10mM的MOPS缓冲液中(150mM NaCl，pH 7.5)。(2)将混合溶液在90℃恒温水浴锅中加热约10分钟，然后缓慢冷却至室温。(3)在杂交产物中混入500μM CuSO4和2mM L‑抗坏血酸(AA)，继而在25℃水浴锅中孵育5分钟即可形成。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于湘潭大学，未经湘潭大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810834448.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
