[发明专利]基因表达载体Wxb

摘要

本发明属于生物技术领域，涉及基因表达载体Wxb‑10T的构建、转基因水稻的制备以及引物。引物见序列表SEQ ID NO.3‑8。以常规粳稻中Wxb等位基因为模板，构建了该等位基因第十外显子处单个核苷酸替换的水稻表达载体Wxb‑10T。该载体携带单碱基突变的全长Wxb等位基因序列，利用农杆菌介导的方法，获得了糯稻中转Wxb‑10T基因的转基因水稻。选育得到纯合系的转基因水稻，该类转基因水稻稻米直链淀粉含量普遍在12%左右，胶稠度和淀粉黏滞性指标与当下流行的优良食味软米接近。此方法通过在糯稻中导入对颗粒结合淀粉合成酶GBSSI编码基因Wx特定核苷酸定点修饰过的水稻表达载体得以实现。

主权项

1.基因表达载体Wxb‑10T专用引物：SEQ ID NO.3   5’ TAAGCTTTAGATCCGCTGCCGCCCCGAAT3’；SEQ ID NO.4   5’CGCCTGCAAAGAACACAAGAACACAACATT3’；SEQ ID NO.5   5’AACAATTCAATTCAGTGCAGAGATCTTCCACA3’；SEQ ID NO.6   5’CCATGACGTCAGAGCCCTTCTGTTCC3’；SEQ ID NO.7   5’GGAACAGAAGGGCTCTGACGTCATGG3’；SEQ ID NO.8   5’TGGTACCTGAACTTGACGTAGACAGACGTACGATA3’。