[发明专利]一种DNA甲基化检测试剂盒及方法在审
| 申请号： | 201810843846.X | 申请日： | 2018-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN109385464A | 公开（公告）日： | 2019-02-26 |
| 发明（设计）人： | 禹汇川;骆衍新;白亮亮;唐冠楠;王小琳;李英杰;黄增鸿;黄美近;汪建平 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第六医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12M1/34 |
| 代理公司： | 北京市万慧达律师事务所 11111 | 代理人： | 谢敏楠;张孟迪 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种DNA甲基化检测试剂盒和方法，尤其涉及一种针对侧翼序列没有CpG位点的检测试剂盒和方法，该试剂盒和方法使用了与小沟结合剂(minor groove binder,MGB)结合的Taqman探针，不仅可以测定CpG岛(CpG Island,CGI)的甲基化，也可测定基因体中的CpG open sea等这种两侧序列没有CpG的孤立CpG位点。该技术不仅非常特异且灵敏，而且操作简便，不需要对照反应和完全甲基化的DNA标准品作为参照，从而可以克服它们带来的缺陷。此外，它具有比现有的MethyLight技术更高的重复性和准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 试剂盒 甲基化 小沟结合剂 侧翼序列 方法使用 检测试剂 基因体 灵敏 孤立 | ||
【主权项】：
1.一种DNA甲基化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：a)将DNA样品的非甲基化的胞嘧啶碱基转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶碱基保持不变；b)用至少一对引物和至少一对覆盖待测CpG位点的寡核苷酸探针扩增步骤(1)转化后的DNA样品；其中，所述的寡核苷酸探针结合MGB；c)分析扩增产物，并从扩增产物的存在性分析待测DNA的甲基化状态。
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