[发明专利]一种无纯化标签的血管内皮细胞生长因子VEGF165b的纯化方法

摘要

本发明涉及一种无纯化标签的血管内皮细胞生长因子VEGF165b的纯化方法，属于生物医药技术领域。本发明利用VEGF165b外显子第6和7位外显子中存在肝素结合域，该区域与肝素琼脂糖树脂结合，通过优化的pH与离子浓度，发明的一种无纯化标签的VEGF165b的纯化方法。通过本发明的纯化方法可得到电泳级纯度的VEGF165b蛋白，增加了其临床应用可能，且降低了生产成本。

主权项

1.一种无纯化标签的血管内皮细胞生长因子VEGF165b的纯化方法，其特征在于：主要包括如下步骤：(1)将肝素琼脂糖亲和层析柱用平衡缓冲溶液平衡，所述平衡缓冲溶液包括Tris‑HCl和NaCl，Tris‑HCl在平衡缓冲溶液中的浓度为10～100mM，NaCl在平衡缓冲溶液中的浓度为1～100mM；平衡缓冲溶液的pH为8.0～8.5；(2)将VEGF165b样品上样到肝素琼脂糖亲和层析柱；(3)用所述平衡缓冲溶液冲洗肝素琼脂糖亲和层析柱；(4)用洗脱液洗脱得VEGF165b蛋白，然后浓缩，即得。