[发明专利]一种检测致病性弧菌的方法

摘要

本发明公开了一种检测致病性弧菌的方法，涉及致病性弧菌检测技术。该检测方法采用如下引物对中的一种或多种的组合进行PCR：SEQ ID NO.1‑2、SEQ ID NO.3‑4、SEQ ID NO.5‑6、SEQ ID NO.7‑8、SEQ ID NO.9‑10、SEQ ID NO.11‑12、SEQ ID NO.13‑14、SEQ ID NO.15‑16、SEQ ID NO.17‑18以及SEQ ID NO.19‑20；利用该方法可对常见的致病弧菌如霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、拟态弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等进行检测，避免非特异性扩增，具有较强的特异性和较高的灵敏度。

主权项

1.一种检测致病性弧菌的方法，其特征在于，其包括：对待测样本的DNA进行PCR扩增反应；所述PCR扩增反应的PCR反应体系中含有如下引物对中的一种或多种的组合：用于检测霍乱弧菌toxR基因的第一引物对，其包括：SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物；用于检测霍乱弧菌ctxAB基因的第二引物对，其包括：SEQ ID NO.3所示的上游引物和SEQ ID NO.4所示的下游引物；用于检测副溶血性弧菌toxR基因的第三引物对，其包括：包括SEQ ID NO.5所示的上游引物和SEQ ID NO.6所示的下游引物；用于检测副溶血性弧菌tlh基因的第四引物对，其包括：SEQ ID NO.7所示的上游引物和SEQ ID NO.8所示的下游引物；用于检测副溶血性弧菌tdh基因的第五引物对，其包括：SEQ ID NO.9所示的上游引物和SEQ ID NO.10所示的下游引物；用于检测副溶血性弧菌trh基因的第六引物对，其包括：SEQ ID NO.11所示的上游引物和SEQ ID NO.12所示的下游引物；用于检测创伤弧菌vvhA基因的第七引物对，其包括：SEQ ID NO.13所示的上游引物和SEQ ID NO.14所示的下游引物；用于检测拟态弧菌toxR基因的第八引物对，其包括：SEQ ID NO.15所示的上游引物和SEQ ID NO.16所示的下游引物；用于检测河流弧菌toxR基因的第九引物对，其包括：SEQ ID NO.17所示的上游引物和SEQ ID NO.18所示的下游引物；用于检测溶藻弧菌coIH基因的第十引物对，其包括：SEQ ID NO.19所示的上游引物和SEQ ID NO.20所示的下游引物；各引物对中的上游引物的5’端或下游引物的5’端标记有用于与催化酶结合的第一亲和物。