[发明专利]一种测定抗VEGF抗体活性的方法及其应用有效
| 申请号： | 201810864854.2 | 申请日： | 2018-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN108918892B | 公开（公告）日： | 2021-04-27 |
| 发明（设计）人： | 吴晓云;杨少伟;李胜峰;俞金泉 | 申请（专利权）人： | 百奥泰生物制药股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;C12N15/85 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 郑彤 |
| 地址： | 510530 广东省广州市科*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种测定抗VEGF抗体活性的方法，用转染了VEGF受体、IL‑1R3、IL‑1R6以及报告基因的效应细胞作为检测材料，由anti‑CD3和anti‑CD28抗体激活Jurkat细胞，并加入VEGF配体，VEGF配体通过与效应细胞上的VEGFR的结合，使得细胞内的IL‑1R3和IL‑1R6相互作用，激活下游的NFAT信号通路，使得报告基因得以表达。当加入抗VEGF抗体后，抗VEGF抗体能够竞争性的与VEGF配体结合，阻断VEGF配体与其受体VEGFR的结合，造成下游的报告基因表达量的减少。该方法操作步骤更为简便，大大缩短了实验时间，检测灵敏度高和准确性好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 测定 vegf 抗体 活性 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种测定抗VEGF抗体活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：提供转染了VEGF受体、IL‑1R3、IL‑1R6以及报告基因的效应细胞；用anti‑CD3抗体和anti‑CD28抗体激活所述效应细胞；向激活后的所述效应细胞中加入VEGF配体，其中，所述VEGF配体能够与所述VEGF受体结合，促使所述效应细胞内的IL‑1R3和IL‑1R6相互作用并表达所述报告基因；及加入待测抗VEGF抗体以阻断所述VEGF配体与所述VEGF受体结合，根据所述抗VEGF抗体的加入量与所述报告基因表达量的参数曲线确定所述待测抗VEGF抗体的活性。
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