[发明专利]一种用于检测土壤中小麦纹枯病菌的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201810881405.9 | 申请日： | 2018-08-05 |
| 公开（公告）号： | CN108977562A | 公开（公告）日： | 2018-12-11 |
| 发明（设计）人： | 潘月敏;李常凤;沈鹏飞;蒋冰心 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 尹明明 |
| 地址： | 230036 安徽省*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测土壤中小麦纹枯病菌的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法，属于生物安全技术领域；所述的RPA引物基于小麦纹枯病菌ITS序列设计，RPA引物序列如SEQ ID No：1和2所示；所述的PRA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，其序列大小为45bp‑54bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端的33bp处进行THF修饰。本发明还提供含有所述的RPA引物和探针的试剂盒。本发明进一步提供基于所述的RPA引物和探针建立的RPA检测方法，首次将RPA技术应用到土壤中小麦纹枯病菌的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为小麦纹枯病的早期诊断、病害防治和农药减量使用提供新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 探针 引物 小麦纹枯病菌 试剂盒 检测 修饰 土壤 小麦纹枯病 病害防治 分子检测 技术应用 区域设计 生物安全 特异性强 仪器设备 引物扩增 引物序列 早期诊断 灵敏度 减量 农药 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测土壤中小麦纹枯病菌的RPA引物和RPA探针，其特征在于：所述的RPA引物基于小麦纹枯病菌ITS序列设计，所述的RPA引物的上游引物如SEQ ID No：1所示，所述的RPA引物的下游引物如SEQ ID No：2所示；所述的PRA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，所述的RPA探针的序列大小为45bp‑54bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端的33bp处进行THF修饰。
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