[发明专利]一种可缓释生物活性因子的脱细胞牛心包基质的制备方法在审
申请号: | 201810890026.6 | 申请日: | 2018-08-07 |
公开(公告)号: | CN109010927A | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | 刘晓红;吴昊;徐志云;夏翠萍 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | A61L27/56 | 分类号: | A61L27/56;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/36 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人: | 郁旦蓉 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种可缓释生物活性因子的脱细胞牛心包基质的制备方法,具有这样的特征,包括以下步骤:步骤一,将牛心包置于非离子型去污剂缓冲液中真空冷冻2~6h;步骤二,将冷冻后的牛心包水浴溶解;步骤三,重复步骤一与步骤二1~10次;步骤四,将冻融后的牛心包置于非离子型去污剂缓冲液中在30~50℃震荡28~96h;步骤五,用无菌去离子水对牛心包清洗12~48h;步骤六,用磷酸盐溶液对牛心包荡清洗48~96h得到牛心包的脱细胞基质;步骤七,将脱细胞基质浸没在生物活性因子琼脂糖材料中20min~2h得到可缓释生物活性因子的脱细胞牛心包基质。 | ||
搜索关键词: | 牛心包 生物活性因子 脱细胞 缓释 基质 非离子型去污剂 脱细胞基质 缓冲液 制备 清洗 无菌去离子水 磷酸盐溶液 真空冷冻 琼脂糖 浸没 冻融 水浴 冷冻 震荡 溶解 重复 | ||
【主权项】:
1.一种可缓释生物活性因子的脱细胞牛心包基质的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,在真空条件下,将牛心包置于非离子型去污剂缓冲液中冷冻2~6h;步骤二,冷冻结束后,将冷冻后的所述牛心包水浴溶解;步骤三,重复步骤一与步骤二1~10次,将所述牛心包进行多次冻融;步骤四,将多次冻融后的所述牛心包放置于非离子型去污剂缓冲液中,并在30~50℃摇床中处理震荡28~96h;步骤五,用无菌去离子水对震荡后的所述牛心包震荡清洗12~48h;步骤六,用磷酸盐溶液对无菌去离子水清洗后的所述牛心包荡清洗48~96h后,得到牛心包的脱细胞基质;步骤七,将所述脱细胞基质浸没在生物活性因子琼脂糖材料中20min~2h,得到可缓释生物活性因子的脱细胞牛心包基质,其中,所述非离子型去污剂缓冲液包括:Tris缓冲液、非离子型去污剂以及脱氧胆酸钠,所述Tris缓冲液的浓度范围为8~12mmol/L,PH值为7.4~7.8,所述非离子型去污剂在所述Tris缓冲液的体积分数范围为0.8%~1.5%W/V,所述脱氧胆酸钠在所述Tris缓冲液的体积分数范围为0~0.8%W/V。
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