[发明专利]人前列腺特异性抗原检测方法及其试剂盒

摘要

本发明公开一种人前列腺特异性抗原检测方法及其试剂盒。本发明以人前列腺特异性抗原为检测对象，将高量子产率金纳米团簇电致化学发光技术和免疫分析技术有机结合，采用还原法制备高量子产率金纳米团簇电致化学发光探针，以二氧化锰纳米材料作为电致化学发光猝灭剂，利用酶联免疫反应产生的抗坏血酸与二氧化锰的氧化还原反应恢复电致化学发光信号，为一种基于高量子产率金纳米团簇探针的高性能电致化学发光人前列腺特异性抗原检测方法。其对人前列腺特异性抗原检测线性范围为5×10^‑4 pg/mL~50 pg/mL，检测限为0.11 fg/mL。具有快速、准确、灵敏度高、选择性和稳定性好、样品用量少等特点，具有较好的临床应用前景。

主权项

1.一种基于高量子产率金纳米团簇探针的电致化学发光人前列腺特异性抗原检测方法，其特征在于：首先在电极表面修饰金纳米团簇，通过还原法制备高量子产率金纳米团簇电致化学发光探针，并进一步在电极表面修饰二氧化锰纳米材料，将其作为电致化学发光信号猝灭剂；在空白酶标板固定人前列腺特异性抗原抗体，加入人前列腺特异性抗原，再加入生物素标记的人前列腺特异性抗原抗体，形成夹心免疫复合物；加入链霉亲和素‑碱性磷酸酶，再加入2‑磷酸‑L‑抗坏血酸三钠盐，通过碱性磷酸酶选择性水解2‑磷酸‑L‑抗坏血酸三钠盐产生抗坏血酸；取出反应液，将电极浸入反应液中，电极表面的二氧化锰与反应液中的抗坏血酸发生氧化还原反应；采集修饰电极的电致化学发光信号，根据电致化学发光信号的改变实现人前列腺特异性抗原的检测。