[发明专利]一种利用产毒海洋亚硫酸杆菌发酵制备石房蛤毒素的方法在审
申请号: | 201810898501.4 | 申请日: | 2018-08-08 |
公开(公告)号: | CN109097415A | 公开(公告)日: | 2018-12-28 |
发明(设计)人: | 张晓玲;杨桥;穆军;蒋志伟;张若男 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12P17/18 | 分类号: | C12P17/18;C12R1/01 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 316100 浙江省舟山市普陀区普*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明属于海洋微生物发酵领域,尤其是涉及一种利用产毒海洋亚硫酸杆菌发酵制备石房蛤毒素的方法。所述的方法包括以下步骤:(1)菌株活化;(2)种子液的准备;(3)发酵罐培养发酵;(4)发酵液的提取;(5)粗提物的纯化,即得石房蛤毒素。与现有技术相比,本发明具有以下优点:(1)本发明方法使用海洋微生物菌株亚硫酸杆菌Z1‑D为生产菌种,该菌种发酵石房蛤毒素产率较高,可达61.5‑72.8μg/L,其发酵时间为40‑48小时,节省能耗;(2)本发明方法步骤简单、工作量小,周期较短,所用试剂与材料均为微生物发酵试验常用试剂,对人体无害,对环境友好,成本低,具有较高的市场前景与经济价值。 | ||
搜索关键词: | 石房蛤毒素 亚硫酸 发酵 杆菌 海洋微生物 制备 发酵罐培养 微生物发酵 发酵领域 方法使用 环境友好 菌种发酵 菌株活化 生产菌种 粗提物 发酵液 种子液 海洋 产率 菌株 工作量 能耗 试验 | ||
【主权项】:
1.一种利用产毒海洋亚硫酸杆菌发酵制备石房蛤毒素的方法,所述的亚硫酸杆菌为亚硫酸杆菌(Sulfitobacter sp.)Z1‑D 菌株,保藏编号为CCTCC AB 2016296,购买自中国典型培养物保藏中心,其特征在于,所述的方法包括以下步骤:(1)菌株活化:将亚硫酸杆菌(Sulfitobacter sp.)Z1‑D接种于斜面培养基中,培养活化菌株;(2)种子液的准备:挑取活化后的单菌落接种于种子罐中的液体种子培养基,扩培菌株待用;(3)发酵罐培养发酵:将发酵培养基装入发酵罐中,将步骤(2)中的种子液接入发酵培养基中,发酵得到发酵液;(4)发酵液的提取:将发酵液板框过滤,获得菌体沉淀,用80%乙醇提取,合并提取液,旋蒸浓缩,得到粗提物;(5)粗提物的纯化:粗提物经半制备色谱进行梯度洗脱,收集石房蛤毒素组分,旋转蒸发溶剂,获得白色粉末,即得石房蛤毒素。
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