[发明专利]一种富集培养法制备噬菌蛭弧菌制剂的方法

摘要

一种富集培养法制备噬菌蛭弧菌制剂的方法，属于生物技术领域。涉及多种蛭弧菌的富集法培养、宿主菌培养及其生物制剂的生产方法。其特征在于利用富集培养法培养的养殖水体中自然形成的蛭弧菌体系为生物制剂的蛭弧菌菌种来源，以养殖水体中的致病性弧菌经纯化、培养、离心、灭活后做为生产蛭弧菌制剂的宿主菌来源，生产一种含有多种蛭弧菌的生物制剂。这种方法生产的蛭弧菌制剂，由于含有多种蛭弧菌，具有活性高、作用迅速、对水体中的病原菌裂解普广等特性。

主权项

1.一种富集培养法制备噬菌蛭弧菌制剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：宿主菌的分离：以TCBS选择性培养基培养、分离并纯化养殖水体水样中的弧菌，并做为制备噬菌蛭弧菌制剂的宿主菌菌种；步骤二：宿主菌浓悬液的制备：将步骤一纯化后的弧菌在液体培养基中培养至弧菌生长的稳定期后，得到发酵液；发酵液经离心分离去掉发酵液培养基，将余下弧菌菌体的菌泥以等体积的灭菌海水稀释，做水浴热灭活处理，获得灭活宿主菌浓悬液；步骤三：噬菌蛭弧菌的富集培养：将过滤除菌后的养殖水体水样加入步骤二制备的灭活宿主菌浓悬液，摇床培养至液体由浑浊转为清澈，即为噬菌蛭弧菌富集培养液；步骤四：噬菌蛭弧菌母液的制备：取步骤三制备的蛭弧菌富集培养液与步骤二制备的灭活宿主菌浓悬液，制备双层平板，培养至出现噬菌斑并融合后，加入灭菌海水浸泡，即为由多种蛭弧菌混合的蛭弧菌母液；步骤五：噬菌蛭弧菌制剂的制备：将步骤四的蛭弧菌母液与灭活宿主菌浓悬液进一步扩大培养，得到蛭弧菌母液扩大液；按比例将灭活宿主菌浓悬液、蛭弧菌母液扩大液加入过滤除菌海水中，即为噬菌蛭弧菌制剂。