[发明专利]一种碱性黄秋葵多糖的分离提取方法及其用途

摘要

本发明公开了一种碱性黄秋葵多糖的分离提取方法及其用途，以市售新鲜黄秋葵嫩果为原料，经热风干燥并粉碎后，称取适量的黄秋葵干粉，在一定的碱性pH值和适当的温度下进行多糖的提取、分离。黄秋葵作为一种种植广泛的蔬菜，相比较传统的中药，价格低廉，得到的黄秋葵多糖对人体无副作用。同时，相比较现有调节肠道益生菌群保健品，黄秋葵多糖不会产生腹泻，克服了来源于牛乳的低聚糖产品的缺陷。

主权项

1.一种碱性黄秋葵多糖的分离提取方法，其特征在于包括如下步骤：步骤1：预处理取新鲜的黄秋葵嫩果，洗净、去蒂、去籽，干燥后粉碎，过60目筛，得到黄秋葵干粉；取500g获得的黄秋葵干粉，浸泡于4～5倍体积的无水乙醇中，4℃静置24h，抽滤后收集滤饼；步骤2：回流提取将步骤1得到的滤饼置于pH值为8.5的氢氧化钠溶液中，加热提取两次，离心后合并上清液；步骤3：浓缩醇沉将步骤2获得的上清液浓缩至原体积的1/5～1/10，向浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，搅拌均匀后于4℃下静置8～12h使其充分沉淀，离心后收集沉淀物；步骤4：除蛋白用少量蒸馏水将沉淀物溶解，用Sevag法除去溶液中的蛋白质直至紫外检测无280nm处的蛋白吸收峰，对去除蛋白后的溶液进行浓缩和透析；步骤5：分级首先将步骤4得到的溶液5000g进行离心或者过滤处理，然后上DEAE cellulose‑52柱，分别用水和0.3mol/L氯化钠溶液进行洗脱，至苯酚‑硫酸法显色无黄色出现，收集洗脱液，将所得洗脱液浓缩至原体积的1/10～1/20；步骤6：纯化将步骤5得到的浓缩液5000～6000g离心，然后于葡聚糖凝胶G‑150色谱柱中洗脱，洗脱液为水，用苯酚‑硫酸法检测洗脱后的样品，收集多糖含量最高的洗脱组分，经72h蒸馏水透析、浓缩、冷冻干燥后得到黄秋葵多糖。