[发明专利]一种方格星虫体腔液中抗菌肽的制备方法在审
| 申请号： | 201810915472.8 | 申请日： | 2018-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN109182427A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 曹玉坡;李积华;代亚萍;周伟;韩志萍;李亚会 | 申请（专利权）人： | 中国热带农业科学院农产品加工研究所 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 齐则琳;张雷 |
| 地址： | 524001 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种方格星虫体腔液中抗菌肽的制备方法，包括以下步骤：清洗吐沙的步骤、收集体腔液的步骤、超声破碎的步骤、离心过滤的步骤、酶解的步骤，得到方格星虫体腔液目标抗菌肽。本发明通过超声波技术、酶解相结合的集成技术，利用低超声波处理裂解获取其胞内蛋白质，提供一种温和高效的细胞破碎工艺，为后续大量制备该蛋白水解提取提供便利；然后将方格星虫体腔液通过蛋白酶进行酶解，通过控制酶解的时间、温度、加酶量，获取具有高抑菌性的抗菌肽。 | ||
| 搜索关键词： | 体腔液 方格星虫 抗菌肽 酶解 制备 蛋白酶 胞内蛋白质 超声波处理 超声波技术 超声破碎 蛋白水解 集成技术 离心过滤 细胞破碎 加酶量 抑菌性 裂解 吐沙 清洗 便利 | ||
【主权项】：
1.一种方格星虫体腔液中抗菌肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：清洗吐沙的步骤：挑选新鲜生命力旺盛的方格星虫，用除菌海水清洗后；将方格星虫喂养于淡盐水中，每隔1h换水喂养，待方格星虫吐尽泥沙；收集体腔液的步骤：将吐尽泥沙的方格星虫取出，用无菌水冲洗，用滤纸吸收体表多余水分，持镊子夹住星虫前段，使之垂直于消毒离心管中，在虫体末端剪一小口，使体液自然流出，逐条收集；超声破碎的步骤：将收集的体腔液进行超声破碎裂解；离心过滤的步骤：再将超声处理后的体腔液离心，用醋酸纤维膜过滤除菌，放入‑20℃冰箱保存，得到体腔液蛋白粗提物；酶解的步骤：将体腔液蛋白粗提物分别采用蛋白酶酶解，进行酶解后，酶解液放入沸水中灭酶，将酶解液离心，收集上清液，冷冻干燥，得到方格星虫体腔液目标抗菌肽。
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