[发明专利]一种共表达IL18和CCL19蛋白及靶向MUC1基因CAR-T细胞的制备方法在审
| 申请号： | 201810923590.3 | 申请日： | 2018-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN109055430A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 陈相波;冯煜;雷鸣;田朋飞 | 申请（专利权）人： | 杭州荣泽生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12N15/62 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 311215 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种共同表达IL18和CCL19蛋白及靶向MUC1基因CAR‑T细胞的制备方法，包括将包含IL18和CCL19蛋白编码序列及靶向MUC1 CAR的慢病毒转染CD4+/CD8+阳性细胞；以及筛选并培养扩增转染后的T细胞以获得共表达IL18和CCL19蛋白及靶向MUC1基因的CAR‑T细胞。本发明通过表达第三细胞信号IL18和CCL19增强了CAR‑T细胞的增殖能力和生存周期，提高了CAR‑T细胞在实体瘤里的渗透作用，维持了CAR‑T细胞对实体瘤的杀伤作用。另外，本发明共表达的IL18和CCL19都由2A短肽连接，可以分别表达。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 共表达 蛋白 实体瘤 转染 制备 蛋白编码序列 杀伤作用 渗透作用 生存周期 细胞信号 阳性细胞 增殖能力 慢病毒 短肽 扩增 筛选 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种共同表达IL18和CCL19蛋白及靶向MUC1基因CAR‑T细胞的制备方法，包括以下步骤：准备CD4+/CD8+ T细胞；准备共表达IL18和CCL19蛋白及靶向MUC1基因的嵌合抗原受体慢病毒；将准备的慢病毒用于感染CD4+/CD8+ T细胞，antiCD3+CD28抗体激活T细胞扩增培养，通过荧光筛选实验以获得共表达IL18和CCL19蛋白及靶向MUC1基因的CAR‑T细胞。
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