[发明专利]利用CRISPR/Cas9技术创制不包颈水稻两系不育系的方法在审
| 申请号： | 201810925855.3 | 申请日： | 2018-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN109306358A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 张志刚;颜应成;曹孟良;吕启明;张志华;罗孝和 | 申请（专利权）人： | 湖南杂交水稻研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N9/22;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 安化县梅山专利事务所 43005 | 代理人： | 夏赞希 |
| 地址： | 410000*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供一种利用CRISPR/Cas9技术培育不包颈不育系水稻的方法，包括：根据水稻中EUI基因编码序列设计靶标序列，构建含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9‑EUI‑gRNA重组载体；通过农杆菌转化水稻愈伤组织获得转基因苗；转基因苗经阳性筛选、测序分析、转基因元件检测，得到不含转基因成分的功能缺失突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术对EUI基因进行定点突变，实现定向创制既不带转基因成分又不包颈水稻不育系的方法，具有靶向效率高、育种周期短、成本低、实用性强等优势。 | ||
| 搜索关键词： | 包颈 转基因苗 转基因 水稻 靶标 功能缺失突变体 水稻愈伤组织 两系不育系 农杆菌转化 水稻不育系 转基因元件 编码序列 测序分析 定点突变 序列片段 阳性筛选 育种周期 重组载体 不育系 靶向 构建 检测 培育 | ||
【主权项】：
1.利用CRISPR/Cas9技术培育不包颈水稻两系不育系的方法，其特征在于：根据籼稻和粳稻EUI基因第二外显子中相同的编码序列设计两条靶序列，构建含两条靶序列片段的pCRISPR/Cas9‑EUI‑gRNA重组载体，将重组载体遗传转化水稻两系不育系，实现对水稻EUI基因的定点突变，从而获得不包颈两系不育系水稻。
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