[发明专利]曼氏无针乌贼胚胎整体原位杂交的方法在审
| 申请号： | 201810927830.7 | 申请日： | 2018-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN109055497A | 公开（公告）日： | 2018-12-21 |
| 发明（设计）人： | 柳意樊;刘炳舰;张建设;景斐;夏立萍 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6841 | 分类号： | C12Q1/6841 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了曼氏无针乌贼胚胎整体原位杂交的方法，属于头足类胚胎整体原位杂交技术领域，原位杂交的方法包括组织复水、通透处理、固定、预杂交和杂交、杂交后洗涤、封闭、抗体、显色，通透处理步骤为：将复水后的去膜胚胎置于含蛋白酶K和水杨酸溶液中，消化处理胚胎；固定步骤为：将通透处理过的胚胎浸入含有苏氨酸的PFA‑PBS溶液中，室温固定，然后用1×PBST溶液洗涤。有益效果为：本发明原位杂交的方法步骤少，简单易行，能增加探针与靶核酸结合的机会，阻止染色体收缩，提高杂交信号，同时固定渗透效果较佳，能避免RNase污染，提高原位杂交的结果的可靠性。 | ||
| 搜索关键词： | 胚胎 整体原位杂交 原位杂交 通透 曼氏无针乌贼 复水 洗涤 杂交 水杨酸溶液 固定步骤 消化处理 杂交信号 浸入 蛋白酶K 靶核酸 苏氨酸 预杂交 染色体 抗体 去膜 探针 显色 收缩 封闭 污染 | ||
【主权项】：
1.曼氏无针乌贼胚胎整体原位杂交的方法，包括组织复水、通透处理、固定、预杂交和杂交、杂交后洗涤、封闭、抗体、显色，其特征在于：所述通透处理步骤为：将复水后的去膜胚胎置于含蛋白酶K和水杨酸溶液中，消化处理胚胎。
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