[发明专利]唐古特虎耳草中黄酮类化合物的定向分离纯化方法

摘要

本发明公开了唐古特虎耳草中黄酮类化合物的定向分离纯化方法。通过采用中压色谱塔、二维制备液相色谱系统、二维制备液相色谱系统制得黄酮类化合物单体。本发明具有以下优点：采用中压色谱塔和二维制备液相色谱从唐古特虎耳草95%乙醇提取物中定向分离纯化黄酮类化合物，其中中压色谱塔采用MCI固定相、第一维色谱分离采用亲水色谱柱、第二维色谱分离采用反相色谱柱，三步色谱分离均为可视化操作，不但快速、简单，而且易于规模化扩大。本发明方法，可实现黄酮类化合物的目标制备，可获取批量的已知活性黄酮，同时富集分离微量黄酮，从而可以不断丰富黄酮类化合物库，为黄酮类化合物的活性研究和单一成分的新药开发提供物质基础。

主权项

1.唐古特虎耳草中黄酮类化合物的定向分离纯化方法，包括以下步骤：⑴采用中压色谱塔，将唐古特虎耳草95%乙醇提取物进行色谱分离，按下述线性梯度洗脱方式进行洗脱：0~90 min，体积浓度0%→100%B；90~120 min，体积浓度100%B；收集馏分共计9个组分，利用高效液相色谱结合黄酮类化合物特征紫外吸收光谱进行筛查，确定黄酮类化合物主要分布于馏分7中，将馏分7减压浓缩至恒重；⑵采用二维制备液相色谱系统，将中压色谱塔分离所得的馏分7经第一维制备型高效液相色谱分离，并按下述线性梯度洗脱方式进行洗脱：0~60 min，体积浓度90%→65%B；利用高效液相色谱结合黄酮类化合物特征紫外吸收光谱进行筛查，最终确定收集的馏分共计9个组分，每个组分减压浓缩至恒重；⑶采用二维制备液相色谱系统，将所述馏分1~9共9个组分经第二维制备型高效液相色谱分离，并按下述线性梯度洗脱方式进行洗脱：0~60 min，体积浓度17%→23%B；定向收集母核离子为303，287和317的色谱峰，减压浓缩至恒重，即得黄酮类化合物单体。