[发明专利]弯曲菌细胞膨胀致死毒素A型，B型和C型三重PCR检测引物及试剂盒

摘要

本发明公开了一种弯曲菌细胞膨胀致死毒素A型，B型和C型三重PCR检测引物及试剂盒，所述弯曲菌分为结肠弯曲菌、空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌，对应引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.18所示。本发明的三重PCR检测方法能快速、准确的检测出弯曲菌细胞膨胀致死毒素，可对弯曲菌细胞膨胀致死毒素A型，B型和C型的单个毒素进行检测，也可对A型，B型和C型毒素同时检测，省时省力，使原来需要做三次PCR和三次电泳的检测，现在一次就可以完成，传统的单一PCR方法检测时间一般2‑3天，该三重PCR方法将检测时间缩短至4 h，大大提高了工作效率，可用于弯曲菌毒素型普查、分子流行病学调查及疫苗筛选和检测。

主权项

1.弯曲菌细胞膨胀致死毒素A型，B型和C型三重PCR检测引物，其特征在于，所述弯曲菌分为结肠弯曲菌、空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌，对应引物的核苷酸序列分别为：①结肠弯曲菌三对特异性引物：CCCDTAF：ATTGCCAAGGCTAAAATCTCCCCDTAR：TCGTACCTCTCCTTGGCGCCCDTBF：GATAAAGTCTCCAAAACTGCCCCDTBR：ATGAAAAAAATTATATGTTTATTTTTATCCCCDTCF：GCTTAATACAGTTACGATAGCCCDTCR：TTCTAAAGGGGTAGCAGCTG②空肠弯曲菌三对特异性引物：CJCDTAF：GCTACTTGGAATATGCAAGGCJCDTAR：AGGACTTGAACCTACTTTTCCJCDTBF：TGGTTCTCTATTRAAATCWCCCJCDTBR：AGGTGGAGTAGTTAAAAACCCJCDTCF：ATCTTTTAACCTTGCTTTTGCCJCDTCR：AAGGGGTAGCAGCTGTTAA③胎儿弯曲菌三对特异性引物：CFCDTAF：GTTTGGATTTTCAAATGTTCCCFCDTAR：AAGACAAATGTAAGCACTCCFCDTBF：TATTTATGCAAGTCGTGCGACFCDTBR：AAGCATAAGTTTTGCAAACGCFCDTCF：CAAGAGTTCCTCTTAAACTCCFCDTCR：GGCTTTGCAAAACCAGAAG其中，w=a或t，r=g或a；以上引物核苷酸序列从左到右是5’‑末端至3’‑末端的方向。