[发明专利]采用木质纤维素生产富含多不饱和脂肪酸油脂的方法

摘要

针对现有技术所存在的问题，本发明提供了以木质纤维素类农林废弃物为原料发酵高山被孢霉制备富含多不饱和脂肪酸的油脂的工艺。所述工艺包括预处理、糖化、高山被孢霉发酵和油脂提取等步骤。本发明中高山被孢霉的发酵阶段采用温度逐级降低的方法，可以显著提高ARA产量，降低饱和脂肪酸在油脂中的比例，ARA占总油脂比例可达48％。与现有技术相比，本发明所述工艺采用了采用基于产纤维小体细菌的纤维素酶制剂实现木质纤维素的糖化，显著降低了碳源成本和糖化阶段的用酶成本，纤维素糖化效率为80％‑90％。此外，木质纤维素糖化阶段培养基与发酵培养基可循环使用，可以显著节水和减少化学品使用，具有减少废水排放和降低成本的显著效果。

主权项

1.采用木质纤维素生产富含多不饱和脂肪酸的油脂的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)预处理：对木质纤维素原料进行预处理，得到木质素含量不高于20％，半纤维素含量不高于25％的木质纤维素底物；(2)糖化：按照固液重量体积比1:2‑1:25将步骤(1)得到的木质纤维素底物转移至厌氧发酵罐的糖化培养基中，将纤维素酶制剂加入所述木质纤维素底物中，在34‑65℃的温度条件下进行水解反应，得到含有葡萄糖的糖液；(3)高山被孢霉发酵：当步骤(2)得到的糖液中葡萄糖浓度达到25‑180g/L后，使糖液通过发酵罐出口装配的过滤组件进入生物反应器；向生物反应器中添加培养基组分，获得发酵培养基，并高温高压灭菌；然后接入活化的高山被孢霉种子液，在4‑35℃的温度条件下、6.0‑6.5的pH下发酵3‑7天，至葡萄糖浓度不高于5g/L时发酵结束；或者在发酵过程中连续流加步骤(2)获得的糖液，使糖浓度维持在5‑10g/L，在4‑35℃的温度条件、补氮且6.0‑6.5的pH下发酵5‑10天，获得发酵液；(4)油脂提取：将步骤(3)得到的发酵液离心处理，将高山被孢霉菌体细胞与发酵后培养基进行固液分离，利用有机溶剂萃取法从菌体细胞中提取含有多不饱和脂肪酸的油脂。