[发明专利]一种基于谱效关系的骨胶原肽质量检测方法

摘要

本发明涉及多肽质量标准技术领域，特别涉及一种基于谱效关系的骨胶原肽质量检测方法。该方法包括以下步骤：(1)建立待检测骨胶原肽供试品的HPLC指纹图谱；(2)然后筛选出特征色谱峰；(3)测定待检测骨胶原肽供试品的抗炎作用；(4)采用灰色关联度分析的方法建立谱效相关性分析，以评价共有峰的抗炎活性。通过采用本发明的方法，得知骨胶原肽中7号峰、1号峰、5号峰与抗炎活性关联度较高。本发明具有方法简便、客观性强、特征峰多等优点，有利于对骨胶原肽进行质量控制。

主权项

1.一种骨胶原肽的HPLC检测方法，其特征在于，包括如下步骤：供试品溶液的制备：将骨胶原肽供试品与稀盐酸混合，取滤液作为供试品溶液；衍生化：将所述供试品溶液、三乙胺的乙腈溶液和异硫氰酸苯酯的乙腈溶液混合后进行衍生反应，再加入正己烷，混匀后静置分层，将下层溶液过滤后得到衍生化的供试品溶液；色谱检测：采用高效液相色谱对衍生化的供试品溶液进行检测，色谱条件为：色谱柱为氨基酸专用柱Sepax AAA；流动相A为醋酸铵溶液与乙腈的混合溶液，所述醋酸铵溶液与乙腈的体积比为(90～95)：(5～10)；流动相B为体积百分含量为70％～90％的乙腈水溶液；梯度洗脱程序为：0min→15min，流动相A：100％→80％；流动相B：0％→20％；15min→18min，流动相A：80％→72％；流动相B：20％→28％；18min→25min，流动相A：72％→50％；流动相B：28％→50％；25min→30min，流动相A：50％→50％；流动相B：50％→50％；30min→30.01min，流动相A：50％→0％；流动相B：50％→100％；30.01min→40min，流动相A：0％→0％；流动相B：100％→100％。