[发明专利]一种壳-核结构固定化酶及其制备方法和应用有效
申请号: | 201810979905.6 | 申请日: | 2018-08-27 |
公开(公告)号: | CN109182324B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 罗志刚;陈永志;程建华 | 申请(专利权)人: | 华南协同创新研究院 |
主分类号: | C12N11/098 | 分类号: | C12N11/098;C12N11/082;C12N11/087;C12N11/04 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 雷月华 |
地址: | 523808 广东省东莞市松*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于固定化酶领域,具体涉及一种壳‑核结构固定化酶及其制备方法和应用。制备方法包括如下步骤:将酶蛋白配制成酶溶液,向酶溶液中添加修饰剂,混匀后反应2‑10h得到表面双键修饰的酶蛋白;然后向双键修饰的酶溶液中添加质量比为,涡旋混匀后,除去溶解氧,依次添加交联剂、引发剂和催化剂,将溶液置于室温下反应1‑5h后,透析纯化,得到壳‑核结构的固定化酶。与传统固定化酶方法相比,本发明实现了在更小尺度上对酶进行固定化,提高了酶的固定化效率,使得最终形成的“壳”结构实现了对所有酶分子的包埋固定,同时得到的固定化酶体系具有较高的酶活保留率、环境稳定性和更广泛的应用领域等诸多优良性质。 | ||
搜索关键词: | 一种 结构 固定 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.一种壳‑核结构固定化酶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)蛋白表面的双键修饰:将酶蛋白配制成酶溶液,向酶溶液中添加修饰剂,混匀后,将溶液至于4‑30℃下反应2‑10h,得到表面双键修饰的酶溶液;其中修饰剂和酶的摩尔比为(5‑200):1;(2)双键修饰酶蛋白的胶囊化:向步骤(1)双键修饰的酶溶液中添加质量比为1‑10倍的单体,其中单体与酶的质量比为(1‑10):1;涡旋混匀后,除去溶解氧,然后,依次添加交联剂、引发剂和催化剂,其中交联剂与酶的质量比为(0.1‑1):1、引发剂与酶的质量比为(0.5‑1):1、催化剂与酶的质量比为(1‑2):1;将溶液置于室温下反应1‑5h后,透析纯化,得到壳‑核结构的固定化酶。
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