[发明专利]一种凝胶型微生物菌剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种凝胶型微生物菌剂的制备方法，属于生物制品制备技术领域。本发明通过天然根瘤菌与硝化菌的混合菌种作为包埋菌，根瘤菌中的固氮酶能够固定铵盐和硝酸盐，硝化菌能将亚硝酸盐等转化为硝酸盐物质，本发明以过硫酸钾和四甲基乙二胺为氧化还原引发体系，通过自由基聚合法打开聚氨酯丙烯酸酯大分子单体两端的双键，并互相交联，从平面交联到空间交联，粉煤灰中的一些成分还能与土壤中重金属污染物作用使其絮凝沉淀，两者协同作用，提高微生物菌剂的存活率，此外微生物水凝胶载体表面形成多种菌种的生物质膜，水凝胶载体内部根瘤菌的生物抗性强，损失的根瘤菌能够重新侵入作物根系中发挥固氮作用，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种凝胶型微生物菌剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取大豆根须切碎后用乙醇溶液浸泡3～5min，过滤去除滤液，得到滤渣，再用次氯酸钠溶液和蒸馏水依次清洗2～3次，得到根瘤菌提取物；（2）将根瘤菌提取物与消化杆菌菌种混合，得到混合菌种，将混合菌种接种于活性污泥中，得到活性污泥菌液，向活性污泥菌液中加入氯化铵、碳酸氢钠、二水硫酸钙、七水硫酸镁，常温下培养20～25天，得到富集培养菌液，备用；（3）按重量份数计，向上述四口烧瓶中加入80～90份甲苯二异氰酸酯，搅拌反应，待四口烧瓶降温，依次向四口烧瓶中加入10～15份甲基丙烯酸羟乙酯、20～30份甘油和20～25份马来酸酐，再将3～5份二月桂酸二丁基锡溶于35～40份丙酮中，得到引发液，用恒压滴液漏斗将引发液滴入四口烧瓶中，边滴加边升温，升温后继续反应，得到聚氨酯预聚乳液；（4）将富集培养液放入离心浓缩机中离心浓缩，得到污泥浓度为4～5g/L的污泥悬浊液，按重量份数计，将20～25份污泥悬浊液与70～75份聚氨酯预聚乳液混合并掺入3～5份活性炭粉末，倒入模具中，向模具中加入1～2份四甲基乙二胺、6～8份过硫酸钾、10～15份海藻酸钠，常温下反应，得到聚氨酯包埋微生物菌剂凝胶；（5）按重量份数计，将40～50份粉煤灰、10～20份生石灰、5～10份纳米氧化铝、1～15份硅酸钠和4～5份页岩混匀，进行造粒，得到生料球，将生料球置于烘箱中烘干后，再加热煅烧，随后移入电阻炉中焙烧，得到活化纳米粉；（6）将聚氨酯包埋微生物菌剂凝胶用切粒机切成3mm×3mm×3mm的包埋颗粒，将包埋颗粒与活化纳米粉混合得到负载基体，将负载基体置于沼液中浸渍培养，挂膜后得到凝胶型微生物菌剂。