[发明专利]一种黄姑鱼前体脂肪细胞的分离培养及其诱导方法有效
| 申请号： | 201811011112.1 | 申请日： | 2018-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109182256B | 公开（公告）日： | 2020-07-17 |
| 发明（设计）人： | 谭朋;楼宝;王立改;詹炜;刘峰;谢庆平;陈睿毅;徐冬冬 | 申请（专利权）人： | 浙江省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏;何俊 |
| 地址： | 316021 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及细胞培养技术领域，公开了一种黄姑鱼前体脂肪细胞的分离培养及其诱导方法，分离培养包括：1）先用胰酶溶液对黄姑鱼脂肪组织块消化，然后使用Ⅱ型胶原酶消化液处理黄姑鱼脂肪组织块；2）将解离的黄姑鱼前体脂肪细胞接种到细胞培养瓶中，采用前体脂肪细胞培养基进行培养，形成细胞单层。诱导方法为将获得的黄姑鱼前体脂肪细胞用胰酶溶液消化处理后，接种到6孔板中培养，然后转移至前体细胞诱导培养基中继续培养。本发明能够成功获得黄姑鱼前体脂肪细胞以及进一步诱导获得成熟脂肪细胞，具有方法简便易行、重复性好、成本低和细胞生长迅速的优点，可为黄姑鱼营养代谢的分子细胞生物学研究提供有效的体外细胞模型。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 黄姑鱼前体 脂肪 细胞 分离 培养 及其 诱导 方法 | ||
【主权项】：
1.一种黄姑鱼前体脂肪细胞的分离培养方法，其特征在于包括以下步骤：1）先用质量分数为0.2‑0.3%的胰酶溶液对黄姑鱼脂肪组织块消化5‑10min，然后使用Ⅱ型胶原酶消化液处理黄姑鱼脂肪组织块12‑16h，获得黄姑鱼前体脂肪细胞；2）将解离的黄姑鱼前体脂肪细胞接种到细胞培养瓶中，置于25‑30℃的细胞培养箱中，采用前体脂肪细胞培养基进行培养，形成细胞单层。
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