[发明专利]一种内耳毛细胞体外分离培养的方法有效
| 申请号： | 201811017201.7 | 申请日： | 2018-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN109280634B | 公开（公告）日： | 2022-02-18 |
| 发明（设计）人： | 陈烨;张璐雯;管敏鑫 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310027 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种内耳毛细胞体外分离培养的方法，所述方法为：将耳蜗基底膜毛细胞面朝上放置在提前用层粘连蛋白包被的四孔细胞培养板上，然后加内耳毛细胞培养基，每间隔24小时更换培养液，获得内耳毛细胞；所述内耳毛细胞培养基为含体积终浓度2‑15％马血清、体积终浓度2‑15％胎牛血清、体积终浓度1‑2％N‑2细胞因子添加剂的高糖DMEM培养基。本发明方法可以更加高效的分离得到完整的耳蜗基底膜；利用本发明的培养条件，基底膜毛细胞的形态更接近在体状态，外毛以及内毛排列更完整；同时相比传统方法(10％胎牛血清的高糖DMEM培养基)，本发明方法可以延长基底膜毛细胞一倍以上的生存时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 内耳 细胞 体外 分离 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种内耳毛细胞体外分离培养的方法，其特征在于所述方法为：将小鼠耳蜗基底膜的毛细胞面朝上，放置在层粘连蛋白包被的细胞培养孔板上，添加37℃预热的内耳毛细胞培养基，在37℃、5％CO2条件下进行培养，间隔24h更换新鲜培养液，获得内耳毛细胞；所述内耳毛细胞培养基为含体积终浓度2‑15％马血清、体积终浓度2‑15％胎牛血清、体积终浓度1‑2％N‑2细胞因子添加剂的高糖DMEM培养基。
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