[发明专利]鉴别四种天南星科药用植物的荧光PCR检测试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种鉴别四种天南星科药用植物(天南星、半夏、虎掌、水半夏)的荧光PCR检测试剂盒及应用。鉴别四种天南星科药用植物的检测试剂盒，它包括天南星特异引物和特异探针，半夏属通用特异引物、半夏特异探针、虎掌特异探针，水半夏特异引物和特异探针，内标质控特异引物和特异探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑13所示。本发明以特异性荧光探针与模板配对，具有高度的特异性与专一性，并且扩增效率高，灵敏度高，准确率高，重现性好，检测周期短，能在1.5小时内完成检测，且能实时检测DNA扩增反应，具有很高的可行性与应用前景，可以为解决目前中药市场天南星科植物使用混乱的现象提供科学可靠的方法。

主权项

1.一种鉴别四种天南星科药用植物的荧光PCR检测试剂盒，其特征是，所述四种天南星科药用植物为天南星、半夏、虎掌和水半夏；所述荧光PCR检测试剂盒包括天南星特异引物和特异探针，半夏属通用特异引物、半夏特异探针、虎掌特异探针，水半夏特异引物和特异探针，内标质控特异引物和特异探针，其中，天南星特异上游引物TNXF：5’‑AAGTGCGGGGTGAGGGAT‑3’；天南星特异下游引物TNXR：5’‑CGATCAGCCCATCCTTGC‑3’；天南星特异探针TNXP：5’‑X1‑CCTGCCGGGCGATTAACGGCT‑Y1‑3’；半夏属通用上游引物BXUF：5’‑AGTGGTGGACGACGCTCA‑3’；半夏属通用下游引物BXUR：5’‑TTTTCCTCGCTTATTTATATGCTT‑3’；半夏特异探针BXP：5’‑X2‑ACCGCGAAGAACCCAGCCGT‑Y2‑3’；虎掌特异探针HZP：5’‑X3‑CCGTGAAGAACCCAGTCGTCCG‑Y3‑3’；水半夏特异上游引物SBXF：5’‑CCCCCACACTCGTCCTATG‑3’；水半夏特异下游引物SBXR：5’‑CGATGGTCGGGTTCCTCA‑3’；水半夏特异探针SBXP：5’‑X4‑TTGTGCACGGGCGTCATCCA‑Y4‑3’；内标质粒特异上游引物IMF：5’‑ACCGTTACCGAGTCCAGGTG‑3’；内标质粒特异下游引物IMR：5’‑TTCGGACTCGATCAGAGCAC‑3’；内标质控特异探针IMP：5’‑X5‑AAGTACGCTCCATTGGTGACCTCA‑Y5‑3’。