[发明专利]一种时间分辨型荧光传感器及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种时间分辨型荧光传感器及其制备方法和应用，其传感器由Mn@ZGNPs氧化物与多巴胺构成，将该传感器与缓冲溶液和生物硫醇混合，利用生物硫醇抑制多巴胺氧化聚合的原理，使用酶标仪中时间分辨荧光检测的功能获得响应信号。由于不同生物硫醇的还原性差异导致多巴胺的自氧化聚合行为受到不同程度的抑制，因此，该Mn@ZGNPs氧化物在不同浓度不同生物硫醇条件下可获得不同的时间分辨荧光信号。最后用主成分分析（PCA）的方法分析获得时间分辨荧光信号，实现了对谷胱甘肽、L‑半胱氨酸、D‑半胱氨酸和同型半胱氨酸等生物硫醇的区分和检测。本发明能够对4种生物硫醇区分和检测，还可实现人体尿液和唾液中生物硫醇的半定量检测。

主权项

1.一种时间分辨型荧光传感器的制备方法，其特征在于，该方法包括以下具体步骤：步骤1：制备锰离子掺杂的锌锗氧化物将GeO2与NaOH于70~90 ℃下冷凝回流20~36 h，得到0.1~0.6 M Na2GeO3溶液，其中GeO2与NaOH的摩尔比为1∶2；配置1~4 M 的Zn(NO3)2、0.02~0.08 M 的Mn(NO3)2溶液；将 Zn(NO3)2溶液、Mn(NO3)2溶液、浓硝酸溶液（wt = 98%）、Na2GeO3溶液与去离子水以体积比为392∶25∶120∶150∶4400混合，其中Na2GeO3溶液需要缓慢加入，用氨水调节混合溶液pH为8.0~10.0，置于常温下用磁力搅拌0.5~2 h，再转移至反应釜中，设定200~300℃并反应5~8 h；反应结束后，取出固体，设定10000~12000 rpm，10~20 min的条件，水洗离心三次，将所得固体置于烘箱中设定50~70 ℃烘干，制得锰离子掺杂的锌锗氧化物记作Mn@ZGNPs，其具有时间分辨荧光性质；步骤2：制备时间分辨型荧光传感器将不同浓度的多巴胺标准溶液、相同浓度的Mn@ZGNPs溶液和缓冲溶液按体积比1∶1∶1混合，得到荧光强度不同的时间分辨型荧光传感器；其中：所述不同浓度的多巴胺标准溶液、相同浓度的Mn@ZGNPs和缓冲溶液均使用去离子水配制；所述多巴胺标准溶液的浓度为300~2000 μM，使用时以300 μM为浓度梯度；所述Mn@ZGNPs溶液的浓度为0.6~3.0 mg/mL；所述缓冲溶液的配制方法为：Tris作为缓冲物质，其浓度为50~400 mM，使用HCl调节溶液的pH值为8.0～9.0。