[发明专利]一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法有效

专利信息
申请号: 201811031518.6 申请日: 2018-09-05
公开(公告)号: CN109112093B 公开(公告)日: 2021-11-09
发明(设计)人: 唐克轩;马亚男;徐东北;刘航;吴张宽玉;付雪晴;钟旖珺;谢利辉;秦维;陈甜甜;王宇婷;孙小芬 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N5/04 分类号: C12N5/04;C12N15/82
代理公司: 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 代理人: 郑立
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化的方法,包括:1)选取幼嫩青蒿叶片去除下表皮,得到除下表皮的青蒿叶片;2)将所述除下表皮的青蒿叶片置入酶解液中进行酶解,得到酶解混合液;3)将所述酶解混合液过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体;4)将所述原生质体进行瞬时转化。本发明首次在青蒿中建立了原生质体分离及转化的方法,得到原生质体的产量为2.749×105个/g FW,活力为96%,绿色荧光蛋白的转化效率为80%,获得的原生质体产量大,活力高。并且利用青蒿原生质体为受体进行转化,绿色荧光蛋白GFP、荧光素酶LUC及海参荧光素酶REN能够成功表达。
搜索关键词: 一种 青蒿 原生 质体 高效 分离 瞬时 转化 方法
【主权项】:
1.一种青蒿原生质体高效分离及瞬时转化方法,其特征在于,包括以下步骤:1)选取幼嫩青蒿叶片去除下表皮,得到除下表皮的青蒿叶片;2)将所述除下表皮的青蒿叶片置入酶解液中进行酶解,得到酶解混合液;3)将所述酶解混合液过滤离心得到原生质体沉淀,重悬后获得原生质体;4)将所述原生质体进行瞬时转化。
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