[发明专利]一种人类ALDH2基因多态性检测试剂盒及其制备方法和应用

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种人类ALDH2基因多态性检测试剂盒及其制备方法和应用。所述试剂盒由用于扩增ALDH2基因G1510A位点的PCR预混反应液、阳性对照品及阴性对照品组成，所述PCR预混反应液包含用于扩增各位点的特异性引物序列组、探针组和PCR反应液，所述特异性引物组由普通的外引物和带荧光标签的特异性的ARMs引物组成。本发明所述试剂盒用于检测人类ALDH2基因多态性具有灵敏度高、特异性高、操作简便、结果可靠等优点，且能在1小时内完成检测，并且结果判读简单客观。

主权项

1.一种检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由用于扩增ALDH2基因rs671位点的PCR预混反应液、阳性对照品及阴性对照品组成；所述PCR预混反应液包括：引物组、探针组、以及PCR反应液；所述阳性对照品包含：ALDH2基因rs671位点突变型质粒、ALDH2基因rs671位点野生型质粒以及内参基因质粒DNA；所述阴性对照品包括不包含内标基因和目的基因位点的重组质粒；所述引物组由普通的外引物和带荧光标签的特异性的ARMs引物组成，具体序列如下：用于扩增ALDH2基因rs671位点的特异性引物序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.4所示，其中SEQ ID NO.2所示引物的5’端携带FAM荧光基团，SEQ ID NO.4所示引物的5’端携带VIC荧光基团；用于内控的引物序列如SEQ ID NO.5～SEQ ID NO.6所示；所述探针组由特异性taqman‑MGB探针和携带淬灭基团的锁核酸探针组成，核苷酸序列如SEQ ID NO.7～SEQ ID NO.9所示，具体形式如下：内控‑P：5’‑ROX‑ACCACCACGGCCGAGC‑MGB‑BHQ‑3’野生型淬灭基团锁核酸：5’‑BHQ‑ACGATGACAAGGGAT‑3’突变型淬灭基团锁核酸：5’‑BHQ‑TCATCAATGTATCTT‑3’。