[发明专利]在ADSCs为基础的组织工程胆管单元构建中诱导胆管上皮细胞分化的方法在审
| 申请号： | 201811035889.1 | 申请日： | 2018-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN109112095A | 公开（公告）日： | 2019-01-01 |
| 发明（设计）人： | 苏松;李波;胡小东;方程;淦宇 | 申请（专利权）人： | 西南医科大学附属医院 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 成都泰合道知识产权代理有限公司 51231 | 代理人： | 孙恩源;周宇杰 |
| 地址： | 646000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种在ADSCs为基础的组织工程胆管单元构建中诱导胆管上皮细胞分化的方法，包括以下步骤：A、从目标哺乳动物获取脂肪组织；B、获取原代细胞并进行传代培养，获得第三代ADSCs；对第三代ADSCs的表面标志物进行鉴定；C、制备聚乳酸块状支架，将第三代ADSCs制成细胞悬液后缓慢滴加覆盖在聚乳酸块状支架材料上共培养；D、将被覆ADSCs的聚乳酸块状支架移植到所述目标哺乳动物腹腔大网膜内；E、注射EGF和HGF诱导培养分化；F、诱导培养分化1～10周后将支架取出，获得所述目标哺乳动物的胆管上皮细胞。本发明的优点是：成功实现了胆管上皮细胞体外和体内联合培养，该方法具有稳定性强，细胞培育周期短，培育成本低，降低胆管损伤处炎症等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 胆管 胆管上皮细胞 块状支架 哺乳动物 第三代 聚乳酸 分化 单元构建 诱导培养 组织工程 诱导 表面标志物 传代培养 胆管损伤 缓慢滴加 联合培养 稳定性强 细胞培育 细胞悬液 原代细胞 脂肪组织 大网膜 腹腔 支架 制备 注射 取出 体内 移植 覆盖 培育 成功 | ||
【主权项】：
1.在ADSCs为基础的组织工程胆管单元构建中诱导胆管上皮细胞分化的方法，包括以下步骤：A、从目标哺乳动物获取脂肪组织；B、获取原代细胞并进行传代培养，获得第三代ADSCs；对第三代ADSCs的表面标志物进行鉴定；C、制备多个大小不同的聚乳酸块状支架，多个聚乳酸块状支架的尺寸分布范围根据目标哺乳动物腹腔大网膜尺寸范围进行设计，将第三代ADSCs制成细胞悬液后缓慢滴加覆盖在聚乳酸块状支架材料上，得到被覆ADSCs的聚乳酸块状支架，将所述被覆ADSCs的聚乳酸块状支架共培养3～4天；D、根据所述目标哺乳动物腹腔大网膜尺寸从共培养后的被覆ADSCs的聚乳酸块状支架中选择大小合适的支架移植到所述目标哺乳动物腹腔大网膜内；E、定期给予所述目标哺乳动物腹腔内注射EGF和HGF诱导培养分化；F、诱导培养分化1～10周后将支架取出，获得所述目标哺乳动物的胆管上皮细胞。
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