[发明专利]一种血脊髓屏障OGD/R损伤模型及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201811038022.1 | 申请日： | 2018-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN109234233A | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 李在望;蔡小军 | 申请（专利权）人： | 无锡市人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079;C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艳 |
| 地址： | 214023 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种血脊髓屏障（BSCB）氧糖剥夺/复氧（OGD/R）损伤模型的构建方法和应用。我们通过transwell培养体系在上室培养脊髓来源的微血管内皮细胞和在底室培养脊髓来源的混合胶质细胞来构建体外BSCB模型。在transwell上室的微血管内皮细胞与transwell底室的混合胶质细胞通过分泌细胞因子而相互作用，形成具有良好屏障功能的分子膜。我们对构建的体外BSCB进行OGD/R损伤处理后能有效地模拟体内缺血/再灌注对BSCB所造成的损伤，能更直接、准确地了解BSCB缺血/再灌注损伤后其结构和功能的改变特征。该研究结果具有高度的参考价值，从而为临床研究BSCB提供了有效的基础依据。 | ||
| 搜索关键词： | 脊髓 构建 微血管内皮细胞 胶质细胞 损伤模型 底室 缺血 上室 分泌细胞因子 屏障 再灌注损伤 基础依据 临床研究 培养体系 屏障功能 损伤处理 分子膜 构建体 有效地 再灌注 复氧 体外 应用 损伤 体内 参考 研究 | ||
【主权项】：
1.一种血脊髓屏障OGD/R损伤模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1）脊髓来源的混合胶质细胞原代培养；2）脊髓来源的微血管内皮细胞的原代培养；3）利用transwell共培养体系建立体外BSCB模型：将融合后的脊髓来源的混合胶质细胞用胰酶消化，脊髓来源的微血管内皮细胞用ACCUTASE消化，离心后，将重悬的微血管内皮细胞接种于transwell上室内，混合胶质细胞接种于transwell底室，待细胞贴壁后，予换液；4）血脊髓屏障OGD/R损伤模型的构建：待细胞90%以上融合后，将所有培养基弃去，更换成无糖无血清的培养基，transwell置于缺氧培养箱中，培养3h后取出，重新更换为原培养基，在普通细胞培养箱中进行复氧即得脊髓屏障OGD/R损伤模型。
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