[发明专利]用于测定末端转移酶活性的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201811041659.6 | 申请日： | 2018-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN109055505B | 公开（公告）日： | 2021-10-08 |
| 发明（设计）人： | 蔡统聪 | 申请（专利权）人： | 广东菲鹏生物有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/48 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 逯恒 |
| 地址： | 523000 广东省东莞市松山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种用于测定末端转移酶(TdT)活性的方法及试剂盒。所述方法包括：使用TdT在第一单链线性DNA的3’末端加上PolydN；将第二单链线性DNA作为第二单链模板，所述第二单链线性DNA的3’末端具有PolydN'，所述第二单链模板与所述第一单链模板仅通过N‑N'部分进行互补配对；补齐互补DNA后进行扩增并定量检测扩增产物，并根据所述扩增产物含量与所述TdT酶活的对应关系确定所述TdT活性；扩增时所用上下游引物分别与所述第一单链模板及所述第二单链模板结合，且结合部分不包括N‑N'互补区，或同时包括N‑N'互补区与非N‑N'互补区。该方法操作步骤简单快速，试剂成本低，灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 测定 末端 转移酶 活性 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.用于测定末端转移酶活性的方法，其特征在于，包括：a)使用末端转移酶在第一单链线性DNA的3’末端加上多个相同的脱氧核苷酸N得到第一单链模板；b)将第二单链线性DNA作为第二单链模板，所述第二单链线性DNA的3’末端具有多个脱氧核苷酸N'，所述第二单链模板与所述第一单链模板仅通过N‑N'部分进行互补配对；c)通过DNA聚合酶补齐所述第一单链模板与所述第二单链模板未互补部分得到双链DNA；d)对所述双链DNA进行扩增并定量检测扩增产物，并根据所述扩增产物含量与所述末端转移酶酶活的对应关系确定所述末端转移酶活性；在进行扩增时，所用上下游引物分别与所述第一单链模板及所述第二单链模板结合，且结合部分不包括N‑N'互补区，或同时包括N‑N'互补区与非N‑N'互补区。
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