[发明专利]用于检测人类PIK3CA基因E545K突变的引物、检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201811044875.6 | 申请日： | 2018-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN109306374A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 陈渊能;何浪平;陈韵姿 | 申请（专利权）人： | 广州健天基因技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 44228 | 代理人： | 张小黎 |
| 地址： | 510663 广东省广州市高新技术产业*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了用于检测人类PIK3CA基因E545K突变的引物、检测方法及试剂盒。本发明提供的检测引物能与PIK3CA基因E545K的特异序列结合，扩增突变序列。本发明提供的检测方法采用检测荧光信号基团能与扩增片段结合发出荧光信号，利用阻断剂与突变位点对应的野生型序列特异性结合，抑制野生型非特异性扩增。本发明采用竞争性等位基因特异性PCR扩增技术，建立基于实时荧光PCR的试剂盒，可准确检测PIK3CA基因E545K突变。本发明方法操作简单，结果易读；灵敏度高，能检出含0.001％PIK3CA基因E545K突变的样本,实现对PIK3CA基因E545K突变的超灵敏检测。 | ||
| 搜索关键词： | 突变 检测 试剂盒 荧光信号 扩增 引物 等位基因特异性 实时荧光PCR 超灵敏检测 特异性结合 野生型序列 非特异性 检测引物 扩增片段 特异序列 突变位点 突变序列 准确检测 灵敏度 野生型 阻断剂 检出 样本 | ||
【主权项】：
1.用于检测人类PIK3CA基因E545K突变的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：将用于检测人类PIK3CA基因E545K突变的引物、阻断剂、检测荧光信号基团、待测基因样品混合，进行实时荧光定量PCR，获得检测结果；其中，所述引物序列包括突变上游引物和突变下游引物，其中，所述突变上游引物，其长度为15‑40个碱基，与待测PIK3CA基因E545K突变型的一条链互补；所述突变下游引物长度为15‑40个碱基，靠近3’末端的第1、2、3、4或5位的碱基为突变位点，与待测PIK3CA基因E545K突变型的另一条链互补；所述阻断剂能与PIK3CA基因E545K突变位点野生型序列特异性结合，抑制野生型非特异扩增。所述检测荧光信号基团能与PCR扩增片段结合并发出荧光信号。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于广州健天基因技术有限公司，未经广州健天基因技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811044875.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
