[发明专利]一种鸡冠中透明质酸的提取及纯化方法

摘要

本发明公开了一种鸡冠中透明质酸的提取及纯化方法，涉及透明质酸提取技术领域。本发明包括如下方法，通过丙酮液对鸡冠进行硬化，并粉碎，进而通过乙醇以及氯仿和正丁醇溶液的混合液体进行透明质酸的提取，多次过滤除杂的粗质，之后使用乙酸酸化以及碱化并加入链蛋白酶进行分解细胞中的核酸，进一步纯化透明质酸的纯度。本发明通过漫液桶对该液体进行水相分离，简单方便快速，进而缩短鸡冠中透明质酸提取流程。

主权项

1.一种鸡冠中透明质酸的提取及纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，将预处理的新鲜鸡冠，浸入丙酮至鸡冠硬化，之后取出硬化鸡冠干燥；步骤二，粉碎硬化鸡冠，加入6～7倍去离子水，静置并取出滤液，之后收集残渣再次加入去离子水，静置得提取液，并重复三至四次；步骤三，将步骤二中，提取液体加入乙醇以及与提取液和乙醇等体积的氯仿和正丁醇溶液的混合液体，搅拌并静置；步骤四，使用漫液桶(1)溢出上层水相，进行相液分离；步骤五，对步骤四中水相添加2～3倍体积的乙醇，静置后再次重复步骤四，对二次水相进行过滤，对该沉淀物进行干燥，制得粗品；步骤六，将粗品酸化加入氯仿和正丁醇溶液的混合液体，静置，并溢出上层水相，重复2～3次；步骤七，将步骤六中溶液使用氢氧化钠溶液进行碱性调节，加入链蛋白酶，并进行除杂；步骤八，将步骤七中溶液，加入氯仿和正丁醇溶液的混合液体，重复水相分离，2～3次；步骤九，将步骤八中上层水相加入十六烷基溴化铵溶液中，过滤沉淀，并将该沉淀物加入氯化钠溶液搅拌分离，得离心液；步骤十，将上述离心液，加入乙醇进行水相分离，收集下层沉淀物，并对该沉淀物进行干燥。