[发明专利]TRV载体介导的病毒诱导基因沉默系统侵染牡丹幼苗的方法在审
| 申请号： | 201811056926.7 | 申请日： | 2018-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN109022482A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 张延龙;谢力行;张庆雨;孙道阳;牛立新;胡佳媛 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/65 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种TRV载体介导的病毒诱导基因沉默系统侵染牡丹幼苗的方法：利用TRV1载体、以及基于TRV2载体构建的TRV‑PDS、TRV‑GFP等载体对牡丹幼苗进行真空侵染，出现牡丹叶片漂白，叶片和根组织发荧光等症状，实现牡丹植株的基因沉默，本发明为研究牡丹生长发育过程中各个组织相关基因的功能提供了一种简单、快速、低成本的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 牡丹 幼苗 侵染 病毒诱导基因 介导 叶片 生长发育过程 功能提供 基因沉默 牡丹植株 相关基因 载体构建 低成本 根组织 漂白 荧光 研究 | ||
【主权项】：
1.一种TRV载体介导的病毒诱导基因沉默系统侵染牡丹幼苗的方法，其特征在于：该侵染牡丹幼苗的方法包括以下步骤：1)将病毒载体TRV1以及TRV2或者将病毒载体TRV1以及插入有目的基因或报告基因的重组TRV2分别转化农杆菌，将转化得到的含有TRV1的阳性农杆菌与含有TRV2或重组TRV2的阳性农杆菌经培养后于侵染缓冲液中混合，得转化菌液；2)对牡丹幼苗进行清洗、消毒；3)将经过清洗及消毒后的牡丹幼苗整株浸入转化菌液，然后进行真空侵染；4)经过步骤3)后，将牡丹幼苗从转化菌液中取出并重新移栽，然后采用以下条件进行培养：温度为21～25℃，湿度为60～70％，光照强度为1800～2000Lx。
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