[发明专利]一种表达H5亚型HA的复制缺陷型重组H9N2禽流感病毒有效
| 申请号： | 201811076526.2 | 申请日： | 2018-09-14 |
| 公开（公告）号： | CN109136199B | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 李军伟;孙明宏;吴叔文 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;A61K39/295;A61K39/145;A61P31/16 |
| 代理公司： | 11350 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种表达H5N1亚型HA的复制缺陷重组H9N2禽流感病毒，本重组禽流感病毒株作为疫苗同时提供对H5N1亚型和H9N2亚型禽流感的保护，复制缺陷的特性又提高了弱毒疫苗的安全性。本发明的原理是基于没有改变遗传稳定性的前体下，构建的重组流感病毒可同时稳定表达禽流感病毒H9N2和H5N1亚型的表面糖蛋白血凝素HA，但只有在可稳定表达神经氨酸酶H9N2亚型NA的MDCK细胞中，构建的重组病毒才能复制、成功包装出重组病毒粒子，由于缺乏结构蛋白神经氨酸酶NA基因，构建的重组病毒在实验动物体内不能复制，对机体没有致病性，但是能诱导机体产生很强的粘膜免疫应答和细胞免疫应答水平。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 神经氨酸酶 复制缺陷 稳定表达 重组病毒 亚型 复制 禽流感病毒株 细胞免疫应答 粘膜免疫应答 重组病毒粒子 重组流感病毒 表面糖蛋白 复制缺陷型 禽流感病毒 遗传稳定性 结构蛋白 弱毒疫苗 实验动物 禽流感 血凝素 致病性 前体 诱导 疫苗 体内 成功 | ||
【主权项】：
1.一种制备表达H5亚型HA的复制缺陷型重组H9N2禽流感病毒的方法，其特征在于，所述的方法如下：/n1)在H9N2病毒的神经氨酸酶NA的编码基因的5′端的包装信号区和3′端的包装信号区内插入H5N1亚型的血凝素HA基因的开放阅读框，形成用于合成A型流感病毒NA-HA的DNA片段；/n2)将1)中构建的用于合成A型流感病毒NA-HA的DNA片段克隆到质粒上形成重组质粒；/n3)构建表达H9N2流感病毒神经氨酸酶NA基因的MDCK细胞系；/n4)将2)中构建的重组质粒，与表达H9N2的PB2、PB1、PA、HA、NP、M、NS各个基因片段的重组质粒共同转染到293T细胞和可稳定表达H9N2流感病毒神经氨酸酶NA基因的MDCK细胞系中，并收集转染后293T细胞和表达NA的MDCK细胞的上清培养液；/n5)在稳定表达H9N2亚型禽流感病毒神经氨酸酶NA的MDCK细胞系上扩增4)中拯救出的重组流感病毒。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于青岛农业大学，未经青岛农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811076526.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
