[发明专利]臭椿苦酮、晶型、衍生物及制剂、制备方法和作为抗病毒药物的应用

摘要

本发明涉及臭椿苦酮、晶型、衍生物及制剂、制备方法和作为抗病毒药物的应用。本发明利用微生物发酵技术，使得臭椿苦酮的提取率达到2.5％以上，并且公开了臭椿苦酮、晶型及其制剂对乙肝病毒、轮状病毒、诺沃克病毒、星状病毒、肠腺病毒和流感病毒的抗病毒药理数据，其对作用显著优于目前国际临床广泛适用的治疗乙肝一线用药“拉米夫定、恩替卡韦”和治疗病毒性肠胃炎的“喜炎平注射液”，有望被开发作为抗病毒药物。

主权项

1.一种臭椿苦酮的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)预处理：将干燥的臭椿果、臭椿树皮、臭椿根皮、臭椿树枝、臭椿叶、臭椿花、臭椿种子或中药材椿皮中的一种或几种粉碎，得底物；(2)发酵：将适量的生物发酵剂与步骤(1)制备的底物混合后，加入适量体积分数为10‑40％乙醇溶液，调pH值至5.5‑8.2，发酵温度为38‑65℃；发酵8‑48小时后，过滤得发酵液，经浓缩得发酵物；(3)提取：步骤(2)得到的发酵物经色谱分离或色谱分离与超临界二氧化碳萃取相结合的方法得到臭椿苦酮粗品。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于任选包括步骤(4)精制：将步骤(3)得到的臭椿苦酮粗品经重结晶得到臭椿苦酮纯品。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于步骤(1)中所述的粉碎优选粉碎至10‑24目。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中生物发酵剂与底物混合的方式优选如下两种方法之一：①将适量的生物发酵剂与步骤(1)制备的底物混合，搅拌均匀后，转入发酵罐中；或②在发酵罐中每5cm厚度底物层均匀铺散生物发酵剂。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于所述生物发酵剂选自食品药品发酵酶制剂、自然菌类(含植物内生菌)、生物源性菌等中的一种或几种；其中食品药品发酵酶制剂优选淀粉葡萄糖苷酶、α‑乙酰乳酸酶脱羧酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶中的一种或几种，自然菌类优选天然食药菌(如白猴头菌、蝙蝠蛾拟青霉菌丝体、灵芝菌丝体中的一种或几种)、植物内生菌(如内生真菌优选地衣内生真菌Pestalotiopsis sp.、安德氏紫杉霉Taxomyces andreanae等、内生细菌优选枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、产酸克雷伯氏菌Klebsiella oxytoca等、内生放线菌优选牛型放线菌Actinomyces bovis、Streptomyces sp.Tc022等)中的一种或几种，生物源性菌优选人源性嗜酸乳杆菌、植物乳酸杆菌、双岐乳杆菌、长双歧杆菌中的一种或几种。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于生物发酵剂的用量为底物质量的1％‑5％，优选为2％‑4％；乙醇溶液的用量为底物质量的20％‑80％。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于步骤(3)所述的色谱分离优选正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、大孔树脂柱层析、反相硅胶柱层析中的一种或几种结合，超临界二氧化碳萃取的优选条件：任选采用甲醇或乙醇作为夹带溶剂，萃取压力为40MPa，温度为35℃、分离釜Ⅰ压力为8MPa，温度为35℃、分离釜Ⅱ压力为6MPa，温度为35℃。上述权利要求所述的制备方法，其特征在于步骤(4)臭椿苦酮纯品的纯度在98％以上，以步骤(1)中底物的质量计，臭椿苦酮纯品的收率在2.5％以上。