[发明专利]一种用元宝枫叶发酵获取绿原酸的方法

摘要

本发明提供了一种用元宝枫叶发酵获取绿原酸的方法，该方法是以新鲜元宝枫叶为原料，利用芽孢杆菌等微生物对元宝枫叶提取液进行发酵，发酵过程中充分利用元宝枫叶中绿原酸前体物质进行生物转化，从而大量积累绿原酸。所述方法包括将元宝枫叶破壁提取、制备发酵培养基、将菌株接入发酵培养基培养、发酵培养结束后离心取上清液分离纯化得到绿原酸。发酵培养基组成为：蔗糖10～20 g、氯化铵10～20 g、硫酸铜0.01～0.02 g、元宝枫原液200～400 g和1000 mL水。其有益效果在于，所述方法成本低，产量高，纯度高，活性好，操作简单，适合工业生产。

主权项

1.一种用元宝枫叶发酵获取绿原酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）取新鲜元宝枫叶洗净除杂后超声破壁，超声破壁的功率为300～600 w，时间为2～5 min，获得元宝枫原液；2）元宝枫原液发酵培养基的制备：取蔗糖10～20 g、氯化铵10～20 g、硫酸铜0.01～0.02 g和元宝枫原液200～400 g溶于1000 mL水中溶解，灭菌得元宝枫发酵培养基； 3）将菌株活化后接种于步骤2）中的100 mL元宝枫发酵培养基中，在30～40℃，200 r/min条件下培养24～36 h，得发酵液，其中，活化菌株的菌悬液浓度在104～106 CFU/ml，接种量为1～5 ml；4）取步骤3）中发酵液离心，取上清液，调节pH 为2～4，加入1～1.5倍体积有机溶剂后于30～40℃超声波处理5～10 min，再静置8～12h；5）取步骤4）静置后溶液的上清液，浓缩至20 mL，调节pH至2～3，加入1～1.5倍体积乙酸乙酯反复萃取2～3次，浓缩得绿原酸粗提物；6）将绿原酸粗提物中加入甲醇反复溶解离心，浓缩得绿原酸。