[发明专利]一种埃博霉素的膜提取分离工艺在审
申请号: | 201811121591.2 | 申请日: | 2018-09-26 |
公开(公告)号: | CN108912131A | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
发明(设计)人: | 虞龙 | 申请(专利权)人: | 湖州鼎海生物科技有限公司 |
主分类号: | C07D491/044 | 分类号: | C07D491/044 |
代理公司: | 南京汇恒知识产权代理事务所(普通合伙) 32282 | 代理人: | 王月霞 |
地址: | 313112 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 一种埃博霉素的膜提取分离工艺,将埃博霉素a,b发酵液经过有机膜过滤,得到有机膜过滤液,有机膜过滤液再经陶瓷膜过滤后得到陶瓷膜过滤液;然后上凝胶色谱柱洗脱,分段收集经过HPLC检测的洗脱液,得到的洗脱液再经纳滤膜浓缩,将得到的浓缩液经过正相硅胶色谱洗脱,分段收集经过HPLC检测的洗脱液,将分别收集到的洗脱液低温结晶后得到埃博霉素a,b结晶。所述有机膜规格为5000~6000截留分子量。陶瓷膜规格为1000~1500截留分子量。纳滤膜为500~800截留分子量。结晶温度为‑30℃~‑10℃。本发明采用正相色谱分离出浓缩液中的埃博霉素a,b,减少了有机溶剂的使用量,简化了提取工艺,降低了成本。 | ||
搜索关键词: | 洗脱液 有机膜 截留分子量 埃博霉素a 陶瓷膜过滤 埃博霉素 分段收集 分离工艺 过滤液 膜提取 浓缩液 洗脱 正相硅胶色谱 纳滤膜浓缩 凝胶色谱柱 低温结晶 有机溶剂 正相色谱 发酵液 纳滤膜 陶瓷膜 过滤 | ||
【主权项】:
1.一种埃博霉素的膜提取分离工艺,其特征在于包括以下步骤: 1)将埃博霉素发酵液经过有机膜过滤,得到有机膜过滤液,再以过滤液20%体积量的蒸馏水进行清洗,合并有机膜过滤液和洗液,再经陶瓷膜过滤后得到陶瓷膜过滤液;再以过滤液10%体积量的蒸馏水进行清洗,膜工作温度为25~40℃,压力为0.05Mpa~0.3Mpa; 2)将步骤1)得到的陶瓷膜过滤液和洗液上凝胶色谱柱洗脱,HPLC检测洗脱液,收集埃博霉素a和b的总色谱纯度达到80%以上的流分,收集到的洗脱液再经纳滤膜浓缩,得到纳滤浓缩液后,将浓缩液经过正相硅胶色谱洗脱,HPLC检测洗脱液,收集埃博霉素a和b色谱纯度各达到95%以上的流分,将分别收集到的洗脱液低温结晶后分别得到埃博霉素a和b的结晶;膜工作温度为25~40℃,压力为0.05Mpa~0.3Mpa;所述正相硅胶色谱柱中添加有分子印迹聚合物。
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