[发明专利]桑黄护肝多糖PPB-2及其制备方法

摘要

本发明涉及多糖制备技术领域，公开了桑黄护肝多糖PPB‑2的制备方法，包括桑黄粉脱脂和去除苷类和生物碱后得到桑黄残渣；桑黄残渣中加入含质量浓度为0.1％NaCl的聚乙二醇400水溶液提取桑黄粗多糖；桑黄粗多糖提取液经Sevag法除去蛋白质，经透析后用乙醇沉淀得到预制品；预制品经DEAE‑52离子交换层析柱洗脱后，得到3个多糖组分，取第2个组分经葡聚糖G100层析柱洗脱后，得到桑黄护肝多糖PPB‑2；还公开了该制备方法制备得到的桑黄护肝多糖PPB‑2。本发明制备得到的桑黄护肝活性多糖PPB‑2，纯度均一，对四氯化碳引起的小鼠急性肝损伤有很好的保护作用，可用于护肝产品的开发。

主权项

1.桑黄护肝多糖PPB‑2的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)桑黄子实体于60℃烘干至恒重，超微粉碎后，得到桑黄粉；(2)桑黄粉用石油醚脱脂和体积浓度为90％乙醇去除苷类和生物碱后得到桑黄残渣；(3)桑黄残渣中加入含质量浓度为0.1％NaCl的聚乙二醇400水溶液提取桑黄粗多糖，得到桑黄粗多糖提取液，桑黄粗多糖提取液用无水乙醇沉淀得到桑黄粗多糖；(4)桑黄粗多糖经Sevag法除去蛋白质，经透析后用无水乙醇沉淀得到预制品；(5)预制品经DEAE‑52离子交换层析柱洗脱后，苯酚‑硫酸法检测，收集有显色反应的洗脱液，得到3个多糖组分，取第2个组分经葡聚糖G100层析柱洗脱后，苯酚‑硫酸法检测，收集有显色反应的洗脱液，得到桑黄护肝多糖PPB‑2；步骤(5)中，预制品经DEAE‑52离子交换层析柱洗脱的具体步骤为：预制品用蒸馏水溶解配制成20mg/mL溶液，离心，取上清液过0.45μm滤膜，上DEAE‑52离子交换层析柱，用蒸馏水、0.1mol/L NaCl水溶液、0.2mol/L NaCl水溶液和0.4mol/L NaCl水溶液以2.0mL/min流速逐级进行梯度洗脱，洗脱液用自动收集器收集，经苯酚‑硫酸法检测，收集有显色反应的洗脱液，减压浓缩后，‑50℃下真空干燥，得到3个多糖组分。