[发明专利]一种从虾夷扇贝中同时提取两种亚型金属硫蛋白的方法有效
申请号: | 201811140628.6 | 申请日: | 2018-09-28 |
公开(公告)号: | CN109206507B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
发明(设计)人: | 孟春英;张小军;李停停;梅光明 | 申请(专利权)人: | 浙江省海洋水产研究所 |
主分类号: | C07K14/825 | 分类号: | C07K14/825;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/04 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 316021 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及金属硫蛋白提取技术领域,公开了一种从虾夷扇贝中同时提取两种亚型金属硫蛋白的方法。通过氯化锌诱导、多次离心提取、用填料为聚甲基丙烯酸酯的分子筛预装柱一次纯化及阴离子交换层析二次纯化的方法从虾夷扇贝内脏中提取金属硫蛋白。通过本发明的从虾夷扇贝中同时提取两种亚型金属硫蛋白的方法所获得的两种亚型的混合物及两种亚型的单品的纯度高。并且,该方法的提取过程简单,且选用虾夷扇贝内脏为原料进行金属硫蛋白的提取,充分利用企业加工的下脚料,提高了虾夷扇贝的经济价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 扇贝 同时 提取 两种亚型 金属 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
1.一种从虾夷扇贝中同时提取两种亚型金属硫蛋白的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)诱导:将活的虾夷扇贝暴露在氯化锌溶液中诱导;(2)提取:取诱导后的虾夷扇贝的内脏,匀浆,离心提取,得到金属硫蛋白粗提物;(3)一次纯化:将金属硫蛋白粗提物复溶,离心,用滤膜过滤,然后,进行柱色谱分离,收集洗脱液,将洗脱液冷冻干燥,获得虾夷扇贝内脏源两种亚型金属硫蛋白的混合物;(4)二次纯化:取两种亚型金属硫蛋白的混合物复溶,用滤膜过滤,然后,进行阴离子交换层析分离,以NaCl溶液为流动相,收集洗脱液,用巯基试剂进行点滴检测,当巯基试剂显色时,将洗脱液进行脱盐处理,再次收集脱盐后的洗脱液,真空冷冻干燥即可得到两种亚型金属硫蛋白。
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