[发明专利]一种神经细胞快速逆行跨突触标记的方法及应用有效
申请号: | 201811151412.X | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109266682B | 公开(公告)日: | 2022-04-01 |
发明(设计)人: | 林坤章;苏鹏;何晓斌;徐富强 | 申请(专利权)人: | 中国科学院武汉物理与数学研究所 |
主分类号: | C12N15/864 | 分类号: | C12N15/864;C12N15/66;A61K49/00 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 龚莹莹 |
地址: | 430071 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于辅助病毒的构建领域,公开了一种神经细胞快速逆行跨突触标记的方法及应用。本发明利用双链腺相关病毒(SCAAV)作为辅助病毒载体分别装载TVA受体和狂犬病毒外膜糖蛋白(RVG),并包装成病毒,用于ENVA外膜包裹的缺陷型重组狂犬病毒的特异性识别和逆行跨突触标记。经过活体测试结果表明,本发明建立的重组缺陷型狂犬病毒RV‑△G‑X‑ENVA与辅助病毒SCAAV组合系统,可以实现快速逆行跨突触标记,较传统的单链AAV病毒辅助方法节省1‑2周的实验时间,节省物力人力,为缺陷型狂犬病毒在神经网络逆向跨突触标记中的应用上提供了更好的研究工具,为神经网络的结构与功能解析奠定了很好的技术支撑。 | ||
搜索关键词: | 一种 神经细胞 快速 逆行 突触 标记 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.将SCAAV‑hSyn‑DIO‑RVG和 SCAAV‑hSyn‑DIO‑EGFP‑T2A‑TVA病毒混合后对目的位点进行注射;注射后的第3~9天再注射ENVA包裹的缺陷型狂犬病毒;所述的SCAAV‑hSyn‑DIO‑RVG为SEQ ID NO.2所示的多核苷酸;所述的SCAAV‑hSyn‑DIO‑EGFP‑T2A‑TVA为SEQ ID NO.1所示的多核苷酸。
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