[发明专利]一种LRFF细胞在审
申请号: | 201811153193.9 | 申请日: | 2018-09-30 |
公开(公告)号: | CN109337873A | 公开(公告)日: | 2019-02-15 |
发明(设计)人: | 焦顺昌;张嵘;张天赋;周子珊;解佳森;王海燕;吴子明 | 申请(专利权)人: | 北京鼎成肽源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 郭晓迪 |
地址: | 100096 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明使用患者外周血进行ctDNA测序或肿瘤组织进行全外显子测序,筛选出突变位点进行抗原表位预测,连接并合成突变多肽表达基因序列;同时构建慢病毒载体,包装慢病毒,转染APC细胞,完成特异性LV细胞的改造,体外与从外周血中分离的PBMC共培养,筛选出有效的精准多肽,通过精准多肽刺激的第二次冲击,将普通T细胞改造成为具有更精准杀伤能力的LRFF细胞,提高了T细胞对肿瘤细胞的杀伤力。发明提供的LRFF细胞可广泛应用于个体化精准治疗实体肿瘤。 | ||
搜索关键词: | 细胞 外周血 多肽 筛选 抗原表位预测 治疗实体肿瘤 慢病毒载体 外显子测序 表达基因 杀伤能力 突变多肽 突变位点 肿瘤细胞 肿瘤组织 个体化 慢病毒 测序 构建 体外 转染 改造 合成 刺激 应用 | ||
【主权项】:
1.一种LRFF细胞,其特征在于,所述LRFF细胞由以下步骤制备:1)使用人源外周血进行ctDNA测序或肿瘤组织进行全外显子测序,筛选出突变位点;2)根据突变位点进行抗原表位预测,合成突变多肽的基因序列;3)构建表达突变多肽的慢病毒载体,包装慢病毒;4)转染抗原递呈细胞并与PBMC共培养,获得LFF细胞;4)所述突变多肽作为抗原刺激所述LFF细胞,筛选出有效的精准多肽;5)以所述精准多肽作为抗原再次刺激所述LFF细胞,筛选出能够识别所述精准多肽的特异性细胞,即得LRFF细胞。
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