[发明专利]一种代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L-半胱氨酸的方法有效
申请号: | 201811183104.5 | 申请日: | 2018-10-11 |
公开(公告)号: | CN111040979B | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 刘君;魏亮;徐宁 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P13/12;C12R1/15 |
代理公司: | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人: | 李蕊 |
地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明所提供的一种代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L‑半胱氨酸的方法。首先通过敲除L‑半胱氨酸脱巯基酶基因aecD,同时过表达自身的丝氨酸乙酰转移酶基因cysE,获得L‑半胱氨酸积累菌株;然后分别过表达大肠杆菌和拟南芥的丝氨酸乙酰转移酶基因cysE,通过活性比较后,获得最利于L‑半胱氨酸合成的EccysE(M201R);随后分别过表达来源于大肠杆菌和菠萝泛菌的L‑半胱氨酸转运蛋白,比较不同转运蛋白对L‑半胱氨酸产量的影响,获得最利于L‑半胱氨酸分泌的转运蛋白Bcr;再后通过提高前体L‑丝氨酸的水平,促进L‑半胱氨酸的合成。最终以50~60g/L的葡萄糖为底物,经3~4天发酵,L‑半胱氨酸含量达到800~1000mg/L。 | ||
搜索关键词: | 一种 代谢 工程 改造 谷氨酸 杆菌 高产 半胱氨酸 方法 | ||
【主权项】:
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