[发明专利]一种鸭源性成分的ddPCR检测方法及引物在审
| 申请号： | 201811188650.8 | 申请日： | 2018-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN109182471A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 吴潇;唐雪明;白蓝;王金斌;蒋玮;吕贝贝;武国干;刘华 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海开祺知识产权代理有限公司 31114 | 代理人： | 张晓敏;费开逵 |
| 地址： | 201106 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种鸭源性成分的ddPCR检测方法及引物，提取待测样品的DNA作为模板，将鸭的ddPCR引物对和探针加入到扩增反应体系中，利用微滴式数字PCR系统进行ddPCR扩增反应；反应过程：95℃预变性10min；94℃变性15～30s，58～62℃退火1min，35～45个循环；98℃固化10min；扩增结束后，读取信号，使用QuantaSoft Version软件分析数据，获得检测结果，本发明中，鸭的ddPCR引物对和探针与其他物种无交叉扩增，特异性好，灵敏度高，检测灵敏度可以达到12pg/μl，能准确快速检测出混合肉中是否掺有鸭源成分，以及混合肉中鸭源成分所占比例。 | ||
| 搜索关键词： | 引物 混合肉 扩增 探针 退火 扩增反应体系 检测灵敏度 待测样品 读取信号 检测结果 快速检测 扩增反应 软件分析 数字PCR 灵敏度 预变性 检测 变性 微滴 固化 物种 | ||
【主权项】：
1.一种鸭源性成分的ddPCR检测方法，包括以下步骤：1)提取待测样品的DNA作为模板，模板浓度10～50ng/μL；2)将鸭的ddPCR引物对和探针加入到扩增反应体系中，利用微滴式数字PCR系统进行ddPCR扩增反应；反应过程：95℃预变性10min；94℃变性15～30s，58～62℃退火1min，35～45个循环；98℃固化10min；其中，ddPCR引物对包括上游引物和下游引物；3)扩增结束后，读取信号，使用QuantaSoft Version软件分析数据，获得检测结果。
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