[发明专利]一种沙门氏菌快速鉴定与分型方法及试剂盒

摘要

本发明涉及兽用生物制品与食品微生物技术领域，尤其是一种沙门氏菌快速鉴定与分型方法及试剂盒，利用多重PCR方法快速检测禽肉生产链样品或分离株菌液中的沙门氏菌，同时指明其中是否含有肯塔基血清型。一种沙门氏菌快速鉴定与分型的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，基于S.Kentucky 1C1的菌液制备得到PCR模板；步骤2，制备引物组，由stn‑F、stn‑R、gly‑F、gly‑R、bcf‑F、bcf‑R组成；步骤3，基于步骤1得到的PCR模板，利用步骤2得到的引物组建立多重PCR检测的反应体系，该多重PCR检测的反应体系在预定反应条件下得到PCR扩增产物；步骤4，对步骤3获得的扩增产物进行电泳检测，根据电泳检测结果判定是否含有沙门氏菌。

主权项

1.一种沙门氏菌快速鉴定与分型的试剂盒，其特征在于该试剂盒包括：1) 空白对照：dd H20；2) 阳性参照品：S. Kentucky 1C1的DNA，由试剂盒法或水煮法提取获得，作为PCR模板；3）引物组，由引物stn‑F、stn‑R、gly‑F、gly‑R、bcf‑F、bcf‑R组成；各引物的核苷酸序列分别为：stn‑F：5′‑CTTTGGTCGTAAAATAAGGCG ‑3′；stn‑R：5′‑TGCCCAAAGCAGAGAGATTC ‑3′；gly‑F：5′‑TTCCAATTGAAACGAGTGCGG ‑3′；gly‑R: 5′‑ACTAACCGCTTGGGTTGTTGCTGT‑3′；bcf‑F：5′‑GGGTGGGCGGAAAACTATTTC ‑3′；bcf‑R: 5′‑CGGCACGGCGGAATAGAGCAC ‑3′；4）反应酶：2xM5 Taq PCR Mix；6）DNA分子量标准：DL2000 DNA Marker；7）核酸染料；8）琼脂糖。