[发明专利]一种多步连续酶催化微纤维胶原交联改性的方法

摘要

本发明提供一种多步连续酶催化微纤维胶原交联改性的方法，是将微纤维胶原原料分散在去离子水中配置为混合液，称取转谷氨酰胺酶加入至混合液中进行催化反应0.5～3h，然后称取A酶加入至混合液中继续进行催化反应0.5～2h，最后将混合液离心处理取沉淀，将所得沉淀进行后处理，即得交联改性的微纤维胶原。该方法通过少量多次的酶催化使得微纤维胶原在短时间内完成分步交联，从而制备获得机械性能、耐热稳定性和耐酶解性能得到提升的改性微纤维胶原，并且具备生物活性和安全无毒的特点。

主权项

1.一种多步连续酶催化微纤维胶原交联改性的方法，其特征在于是将微纤维胶原原料分散在去离子水中配置为混合液，调节混合液pH为6.0～7.0；然后以微纤维胶原干重计0.1～2.5U/g所称取的转谷氨酰胺酶加入至混合液中于25～30℃下催化反应0.5～3h；催化反应时间到达后，再调节混合液的pH为5.0～7.0，然后以微纤维胶原干重计50～250U/g所称取的A酶加入至混合液中继续于25～30℃下催化反应0.5～2h；催化反应时间到达后，将混合液离心处理取沉淀，将所得沉淀进行包括洗涤、干燥的后处理，即得交联改性的微纤维胶原；所述A酶包括酪氨酸酶、辣根过氧化物酶中的任意一种；当选用辣根过氧化物酶时，在将所称取的辣根过氧化物酶加入至混合液后，还包括加入浓度为5～10×10‑3mol/L的过氧化氢溶液80～200μL，过氧化氢溶液的加入方式为每次滴加2～5μL，间隔60～180s进行下一次滴加，直至滴加完毕。