[发明专利]一种胆固醇浓度的测定方法在审
| 申请号： | 201811212619.3 | 申请日： | 2018-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN109187394A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 鲍志宁;贺珊珊;林伟锋;甘祥武;邓钧尹;李学优 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学;广州市微生物研究所 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 广州致信伟盛知识产权代理有限公司 44253 | 代理人： | 伍嘉陵 |
| 地址： | 510641 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种胆固醇浓度的测定方法，包括：（1）移取胆固醇待测溶液离心，离心后加入95%乙醇和50%KOH溶液在热水浴中皂化；（2）冷却至室温后，加入石油醚，于恒温水浴摇床中震荡萃取；（3）全部转移到分液漏斗中，并用95%乙醇润洗，静置分液，收取石油醚层于烧杯中；（4）通风橱内水浴蒸发有机试剂；（5）用无水乙醇溶解残留物，在热水浴中超声溶解；（6）定容，得到胆固醇溶解液；（7）绘制胆固醇标准曲线；（8）移取胆固醇溶解液于试管中，加入OPA试剂，静置，在冷水浴中沿着试管壁缓慢加入浓硫酸，涡旋至溶液澄清，冷水浴中静置；于分光光度计550nm处测OD值，代入标准曲线方程，计算即得。该方法成本低廉，安全，操作简便，适合广泛推广。 | ||
| 搜索关键词： | 胆固醇 冷水浴 热水浴 溶解液 乙醇 移取 标准曲线方程 恒温水浴摇床 无水乙醇溶解 胆固醇标准 分光光度计 超声溶解 待测溶液 分液漏斗 静置分液 石油醚层 有机试剂 浓硫酸 石油醚 试管壁 通风橱 试管 定容 润洗 烧杯 涡旋 皂化 萃取 冷却 震荡 蒸发 并用 澄清 绘制 安全 | ||
【主权项】：
1.一种胆固醇浓度的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）移取胆固醇待测溶液离心，离心后加入95%乙醇和50% KOH溶液在热水浴中皂化直至皂化完全，得到胆固醇粗液；（2）将胆固醇粗液冷却至室温后，加入石油醚，于恒温水浴摇床中震荡萃取直至萃取完成，得到萃取液；（3）将萃取液全部转移到分液漏斗中，并用95%乙醇润洗，静置分液，收取石油醚层于烧杯中；（4）通风橱内水浴蒸发有机试剂，直至烧杯内无液体残留；（5）用无水乙醇溶解烧杯中残留物，在热水浴中超声溶解，得到胆固醇溶液；（6）定容：将胆固醇溶液再转移到50mL容量瓶中，用无水乙醇润洗烧杯2～3次，洗液并入容量瓶内，并定容到刻度，得到胆固醇溶解液；（7）绘制胆固醇标准曲线；（8）移取步骤（6）中的胆固醇溶解液于干净试管中，加入邻苯二甲醛（OPA）试剂，静置，接着在冷水浴中沿着试管壁缓慢加入浓硫酸，涡旋至溶液澄清，冷水浴中静置；接着于分光光度计550nm处测OD值，将测得的OD值代入胆固醇标准曲线方程，计算待测溶液中胆固醇浓度。
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